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初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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免疫共沉淀(Co-IP)優(yōu)缺點(diǎn)小結(jié)2023/11/28
以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其原理是:當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間...
顆粒培養(yǎng)基使用方法與注意事項(xiàng)2023/11/20
使用方法:1、取瓶?jī)?nèi)弧菌顯色培養(yǎng)基干粉71.3克,用1000ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴(kuò)增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解,不需高壓滅菌,冷至約50℃,傾注滅菌平皿。2、以無(wú)菌操作取檢樣25g(mL)...
培養(yǎng)微生物6大營(yíng)養(yǎng)來(lái)源解讀2023/11/13
微生物不是專用于生物分類學(xué)的名詞,而是指一般需借助顯微鏡才能看清的所有微小生物的統(tǒng)稱,數(shù)量龐大且多樣。微生物中的“微”便是它的特點(diǎn)之一,是人眼不能直接看到的,有些微生物只有粉塵那么大,而有些微生物更小...
人彈性蛋白(ELN)檢測(cè)試劑盒應(yīng)用注意事項(xiàng)2023/11/6
人彈性蛋白(ELN)檢測(cè)試劑盒應(yīng)用注意事項(xiàng):1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀...
科研抗體的制備過(guò)程2023/10/30
抗體的制備過(guò)程:1.免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其...
小鼠骨髓多能干細(xì)胞培養(yǎng)操作2023/10/23
小鼠骨髓多能干細(xì)胞培養(yǎng)操作:培養(yǎng)操作:一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基...
多胺氧化酶(PAO)測(cè)試盒比色法活性計(jì)算2023/10/17
測(cè)定原理:PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過(guò)氧化氫,在過(guò)氧化物酶存在的條件下與底物顯色,在550nm下有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值增加速率來(lái)反映PAO活性。PAO活性計(jì)算:1、按樣本蛋白濃度計(jì)算:?jiǎn)挝欢x:每m...
培養(yǎng)基?間歇滅菌與連續(xù)滅菌比較2023/10/8
培養(yǎng)基間歇滅菌與連續(xù)滅菌比較:1、歇滅菌的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)是設(shè)備要求低,不需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置;操作要求低,適于手動(dòng)操作,適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模;適合于含有大量固體物質(zhì)的培養(yǎng)基的滅菌。缺點(diǎn)是培養(yǎng)基的營(yíng)...
原代細(xì)胞與傳代細(xì)胞培養(yǎng)不同點(diǎn)分析2023/10/5
區(qū)別一:定義不同原代細(xì)胞培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的首培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞培養(yǎng):傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程。對(duì)單...
擴(kuò)增曲線的四個(gè)時(shí)期解釋2023/9/25
擴(kuò)增曲線是描述PCR動(dòng)態(tài)進(jìn)程的曲線,以循環(huán)數(shù)為橫坐標(biāo),以反應(yīng)過(guò)程中實(shí)時(shí)熒光信號(hào)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)。理論上PCR過(guò)程中反應(yīng)產(chǎn)物是以指數(shù)增長(zhǎng)的,但隨著PCR循環(huán)數(shù)的增加,DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
PCR反應(yīng)結(jié)果無(wú)擴(kuò)增條帶分析2023/9/18
PCR反應(yīng)結(jié)果無(wú)擴(kuò)增條帶分析:1、酶失活或在反應(yīng)體系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或運(yùn)輸不當(dāng)而失活,往往通過(guò)更換新酶或用另一來(lái)源的酶以獲得滿意的結(jié)果。2、模板含有雜質(zhì)。特別是對(duì)甲醛固定及石蠟包埋...
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇操作步驟2023/9/11
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇操作步驟:一、凍存1、消化細(xì)胞,將細(xì)胞懸液收集至離心管中。2、1000rpm離心10分鐘,棄上清液。3、沉淀加含保護(hù)液的培養(yǎng),計(jì)數(shù),調(diào)整至5×106/ml左右。4、將懸液分至凍存管中,每...
PCR反應(yīng)循環(huán)參數(shù)注釋2023/9/8
循環(huán)參數(shù):1.預(yù)變性模板DNAwan全變性與PCR酶的wan全激活對(duì)PCR能否成功至關(guān)重要,建議加熱時(shí)間參考試劑說(shuō)明書,一般未修飾的Taq酶激活時(shí)間為兩分鐘。2.變性步驟循環(huán)中一般95℃,30秒足以使...
單克隆抗體的性質(zhì)鑒定方法2023/8/28
當(dāng)獲得多個(gè)雜交瘤細(xì)胞株時(shí),要了解哪一株是zui適用的,則一定要通過(guò)各種鑒定。分析常見的方法有:(一)Ig類型測(cè)定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗體與培養(yǎng)液中單克隆抗體按雙向瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行測(cè)定,確定其Ig類...
胎牛血清質(zhì)控外觀判定要素2023/8/21
拿到血清,zui先接觸的是血清外觀,對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來(lái)說(shuō),外觀的判斷尤為重要。1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上...

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