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原代細胞分化過程的不同之處

時間:2018-1-24閱讀:139
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原代細胞作為抗原遞呈細胞, 在激活T淋巴細胞和維持免疫耐受過程中都有重要作用。Fairchild 等[50] 運用了從CBA/Ca小鼠中得到的新的ES細胞系ESF116懸浮培養14天得到EB, 再加上細胞因子 GM-CSF和IL-3的誘導, Z終得到了成熟的樹突細胞, 并且檢測到了樹突細胞特異性標志物如CD11c、 MHC-II、CD40、CD54、CD80、CD86的 表 達, 同時驗證了誘導分化得到的樹突細胞(ES-DC)具有正常的激活T淋巴細胞的能力。隨后, Senju等運用 OP9共培養的體系也得到了成熟的樹突細胞, 他們采用了ES細胞系TT2, 再加入GM-CSF也得到了表達樹突細胞特異性標志物CD11c的前體細胞, 在用 IL-4、腫瘤壞死因子TNF-α和anti-CD40抗體作用下, 得到成熟的樹突細胞, 并且驗證了無論是形態、表面特異性標記物的表達還是激活T細胞的能力等方面, ES分化得到的樹突細胞與骨髓來源的樹突細胞都極為相似。對于人的ESC來說, 誘導分化的過程又有不同之處。2004年, Zhan等首先報道了用人的ESC分化得到成熟的樹突細胞。他們將高密度的人的ESC鋪到人工基底膜上面, 在含有成纖維細胞生長因子(bFGF)的血清中培養10~20天得到EB后, 再將懸浮的EB轉移到組織培養皿中, 加入SCF、Flt3-L和促血小板生成素(thrombopoietin, TPO)促進EB向造血系統方向分化, Z后在IL-3、GM-SCF和IL-4的刺激下, 誘導成熟樹突細胞的產生。之后, 又有Su等和 Tseng等 也運用類似的方法得到了由人的ES分化得到的成熟樹突細胞。Senju等采用OP9共培養的方法, 也獲得了人的樹突細胞。他們首先在PEF滋養層上培養KhES-1細胞系, 然后通過分離液CTK將細胞鋪到OP9上; 15~18天后轉到新的OP9細胞上, 在此期間加入GM-SCF和M-SCF; 7~10天后在GM-SCF和 IL-4的作用下可以觀察到形狀不規則的細胞, Z后加入TNF-α、LPS、CD40-ligand和IL-4誘導樹突細胞成熟。這種方法得到的ES-DC顯示出了更強的刺激T 細胞增殖的能力。之后, Slukvin等報道了用OP9共培養的方法得到成熟的樹突細胞, 他們的方法類似, 只是稍作改變。此外, Senju等將iPS細胞成功地誘導為成熟的樹突細胞。與ES相比, iPS不同之處在于加入GM-SCF和IL-4等細胞因子后, 其培養時間要久一點, 但得到的成熟的樹突細胞數量要多一些。盡管如此, 無論是對T細胞刺激還是對抗原的加工和呈遞, 原代細胞分化得到的樹突細胞與ES細胞分化得到的樹突細胞都相一致。目前, iPS誘導得到iPS-DC的問題在于目前的分化培養基仍然是以小鼠的為基礎, 因此建立適應于人的ES細胞和iPS細胞的分化培養基, 以及iPS細胞庫的建立對于實現iPS誘導的iPS-DC應用于臨床具有重要的意義。
甲磺酸多拉司瓊相關雜質A標準品    25mg
甲酚曲唑三硅氧烷相關物質D標準品    25mg
磺胺喹喔啉相關物質A標準品    25mg
環丙沙星乙二胺同系物標準品    25mg
環丙沙星相關物質A標準品    25mg
環孢菌素分離度用混合物標準品    25mg
琥珀酸舒馬曲坦相關雜質標準品    25mg
甘羅溴銨相關物質C標準品    25mg
甘羅溴銨紅霉素同分異構體標準品    25mg
氟替卡松丙酸酯系統適用性用混合物標準品    25mg
氟替卡松丙酸酯分離度用混合物標準品    25mg
氟伐他汀用于系統適用性標準品    25mg
呋喃妥因相關物質A標準品    25mg
非索非那定相關物質B標準品    25mg
原代細胞

 

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