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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>細(xì)胞增殖生長(zhǎng)狀態(tài)
人正常組織細(xì)胞初代或傳代培養(yǎng)時(shí),都有一長(zhǎng)短不同的潛伏期。傳代細(xì)胞系、胚胎組織或幼體組織潛伏期短,一般在第二天即可見(jiàn)細(xì)胞生長(zhǎng),一周內(nèi)便可連接成片。成體組織的潛伏期長(zhǎng),老齡組織和癌組織更長(zhǎng),有時(shí)可達(dá)一周左右。
初代組織塊培養(yǎng)法細(xì)胞生長(zhǎng),Z先從組織“長(zhǎng)”出的為游走細(xì)胞,它們多單獨(dú)活動(dòng),形態(tài)不規(guī)則,用縮時(shí)逐格顯微攝電影法可顯示出極活躍的變形、游走和吞噬活動(dòng)。在游走細(xì)胞之后,接著長(zhǎng)出的是成纖維細(xì)胞或上皮細(xì)胞。只有當(dāng)出現(xiàn)細(xì)胞分裂、細(xì)胞數(shù)量逐漸增多、形成較大生長(zhǎng)暈或連接成片時(shí),細(xì)胞才真正進(jìn)入增殖狀態(tài)。成纖維細(xì)胞是Z易生長(zhǎng)細(xì)胞,生長(zhǎng)速度較快,低倍鏡下觀察時(shí),前哨部位細(xì)胞似火焰狀或放射形狀向外擴(kuò)展;如接種為游走細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞等細(xì)胞,在密度不大時(shí),可連接成網(wǎng)狀,只有人正常組織細(xì)胞密度增大時(shí)才連接成片。
上皮細(xì)胞排列緊密,相互接壤成膜狀;上皮膜邊緣整齊,細(xì)胞很少單獨(dú)活動(dòng),生長(zhǎng)時(shí)整個(gè)上皮膜發(fā)生移動(dòng)。上皮細(xì)胞尤其是外胚層來(lái)源的細(xì)胞如表皮細(xì)胞等,生長(zhǎng)過(guò)程中常產(chǎn)生溶解酶,能使細(xì)胞間質(zhì)發(fā)生液化,導(dǎo)致細(xì)胞相互分離,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致細(xì)胞脫落,其確切機(jī)制尚不明了.可能與產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶有關(guān)。
細(xì)胞接種后,經(jīng)過(guò)懸浮期、潛伏期和指數(shù)增生期等后,Z終將長(zhǎng)滿瓶壁,如不及時(shí)做再培養(yǎng),由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗和代謝產(chǎn)物積累,細(xì)胞即進(jìn)入停滯期。此時(shí)細(xì)胞輪廓增強(qiáng),細(xì)胞內(nèi)常出現(xiàn)前述有膨脹線粒體形成的堆積物,細(xì)胞變得粗糙,嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞從瓶壁脫落,只有及時(shí)做傳代,才能使人正常組織細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)。
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