手机版av在线_96精品国产aⅴ在线观看_中文字幕35页_国产亚洲成AV人片在线观黄桃_全黄性色大片_免费视频h

上海莼試生物技術有限公司
初級會員 | 第9年

13585831301

原代細胞測定周期的方法

時間:2017/6/22閱讀:274
分享:


一、原理
原代細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。
單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。
測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法。
BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經過兩個細胞周期后,細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上
應表現為一條單體淺染。如經歷了三個周期,則染色體中約一半為兩條單體均淺染,另一半為一深一淺。細胞如果僅經歷了一個周期,則兩條單體均深染。計
分裂相中各期比例,就可算出細胞周期的值。
二、儀器、用品與試劑
1、儀器、用品:同常規原代細胞培養
2、試劑:BrdU(1.0mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液
三、操作步驟
1、細胞生長至指數期時,向培養液中加入BrdU,使Z終濃度為10μg/ml。
2、44小時加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。
3、48小時后常規消化細胞至離心管中,注意培養上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。
4、常規染色體制片(見第三部分:染色體技術)。
5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上,鋪上2×SSC 液,距紫外燈管6cm處紫外照射30分鐘。
6、棄去2×SSC液,流水沖洗。
7、Giemsa液染色10分鐘,流水沖洗,晾干。
8、鏡檢100個分裂相,計、二、三、四細胞期分裂指數。
9、計算:
原代細胞周期(Tc)=48/{(M1+2M2+3M3+4M4)/100}(小時)
附:(1)BrdU配制: BrdU 10mg十雙蒸水10ml 4℃下避光保存。
(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,檸檬酸三鈉·2H2O 0.88克,加水至100ml,4℃保存。 

 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 久热精品视频在线观看 | japanese23hdxxxxfree日本| 免费黄网站在线观看 | 免费观看黄色片在线观看 | 一区二区三区波多野结衣在线观看 | 精品欧美不卡一区二区在线观看 | 亚洲欧洲国产精品久久 | www.av视频在线观看 | 国产欧美另类久久久品 | 国产精品免费人成网站 | 国产超碰人人爽人人做AV | 国产福利一区二区三区在线视频 | 亚洲精品亚洲人成人网 | 免费又黄又爽又猛大片午夜 | 日韩精品一区二区三区蜜臀 | 丰满人妻翻云覆雨呻吟视频 | 中文字幕一区在线观看视频 | 蜜乳av入口| 国产高清一级毛片在线不卡 | 国产欧美小视频 | 色爱av综合网站 | 99久久免费看精品国产一区 | 麻豆安全免费网址入口 | 日韩一二区在线 | 亚洲欧美精选 | 日本免费高清 | 免费日韩在线视频 | 无码免费毛片手机在线 | 国产普通话刺激视频在线播放 | 欧美日韩国产免费一区二区三区 | 亚洲日本一区二区三区在线 | 色欲av久久无码影院色戒 | 欧美日韩成人在线视频 | 日本精品一区二区三区视频 | 成人福利一区 | 新版天堂资源中文www官网 | 成人欧美一区二区三区A片 亚洲精品成人网站在线 | 蜜芽国产成人精品区 | 少妇激情AV一区二区三区 | 青青草视频在线观 | 国产人妻精品区一区二区 |