特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
z豬胸膜肺炎防線桿菌(APP)核酸檢測試劑盒 | 恒溫熒光法 | FS-P10702 |
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
鹽單胞菌潛在的有機污染物降解菌/分離自石油富集菌群模式菌株: no沉積物/TVMC沉積物/TVMC沉積物/TVMC沉積物(11-15cm)提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 821生長條件: 28℃
平菇生長條件: 25培養基: 14提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法
-1435℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
費希新薩托菌產生真菌素模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0014生長條件: 26C
蜜環菌培養基: 綜合PDA瓊脂:馬鈴薯提取液1.0L ,葡萄糖20.0g ,KH2PO43.0g ,MgSO4·7H2O1.5g ,維生素B1微量g ,瓊脂15.0g ,pH 6.0天麻提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃,好氧 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
ivcas7.00428對小菜蛾有低,對蚜蟲中等性。模式菌株: no種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 0002生長條件: 30℃
釀酒酵母培養基: 312酵母表面展示系統受體菌株,與pYD1質粒配套使用提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法
ivcas7.00691模式菌株: no安全等級: 1種屬: Bacillus│thuringiensis土壤提供形式: 凍干物培養基: 0002生長條件: 30℃
解脂假絲酵母培養基: CM0077檸檬。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
-1436℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
傳染性支氣管炎病分析檢測模式菌株: no病雞支氣管提供形式: 凍結物安全等級: 2培養基: 0生長條件: 37
豬呼吸與繁殖綜合征病用于科研模式菌株: no臟器提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 0生長條件: 37
豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌科研及血清定型模式菌株: no病豬肺提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 814生長條件: 37
木霉屬培養基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
PichiaPink-1模式菌株: 未知
大腸埃希菌教學和科研模式菌株: no臟器提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 335生長條件: 37
異古倫賓HEV 戊型肝炎病(抗原) 成纖維生長因子受體4IgG
乙酰蒲公英萜HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病(抗原) 生物素標記堿性成纖維生長因子受體1 IgG
硬脂甲酯HisX6 聚組氨標簽蛋白 抗纖維生長因子結合蛋白IgG
油甲酯HIV gp120 艾滋病病(抗原) 凝血酶原酶IgG
茵芋苷HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60(抗原) 抗脆性組氨三聯體IgG
羊藿次苷IIHSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原) 抗“衰老關鍵蛋白”IgG
標準品alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原抗體
氧化白藜蘆ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酶抑制劑(抗原) 抗磷化脆性組氨三聯體IgG
乙酰天麻素IDE 胰島素降解酶(抗原) 抗“衰老關鍵蛋白”IgG
3-異倒捻子素IGF-1 R 人胰島素樣生長因子-I受體 絲聚蛋白/中間絲蛋白IgG
z豬胸膜肺炎防線桿菌(APP)核酸檢測試劑盒TobramycinSulfate 硫妥布霉素 質量規格:>95%,BR
TobramycinSulfate 硫妥布霉素(標準品) 質量規格:>95%,BR
Tolnaftate 托萘酯 質量規格:>95%,BR
TopotecanHCl 拓撲替康鹽鹽 質量規格:>95%,BR
TopotecanHCl 拓撲替康鹽鹽(標準品) 質量規格:>95%,BR
Torasemide 托拉塞米 質量規格:>95%,BR
Travoprost 曲沃前列素 質量規格:>95%,BR
TrazodoneHCl 鹽曲唑 質量規格:>95%,BR
TrazodoneHCl 鹽曲唑(標準品) 質量規格:>95%,BR
Trilostane 曲洛司坦/亞硝鹽環氧雄 質量規格:>95%,BR
Trilostane 曲洛司坦(標準品) 質量規格:>95%,BR
TriptorelinAcetate 醋曲普瑞林 質量規格:>95%,BR
VancomycinHCl 鹽萬古霉素 質量規格:>95%,BR
VancomycinHCl 鹽萬古霉素(標準品) 質量規格:>95%,BR
Vandetanib 凡德他尼 質量規格:>95%,BR