【BK-PCR16D】山東博科儀器以客戶為中心,以服務為宗旨,以創新為動力?!颖静杉c處理
樣本采集
根據檢測目的選擇合適的樣本類型,如血液、組織、唾液、鼻腔拭子等。采集血液時,一般選擇前腔靜脈或耳靜脈,使用一次性無菌注射器抽取適量血液,注入含有抗凝劑的采血管中,輕輕顛倒混勻,防止血液凝固。采集組織樣本時,選取病變明顯的部位,如淋巴結、脾臟等,用無菌器械切取適量組織,放入無菌容器中。采集唾液和鼻腔拭子時,使用專用的采樣拭子,在豬口腔或鼻腔內輕輕旋轉擦拭,然后將拭子放入保存液中。
樣本處理
對于核酸檢測,需對樣本進行核酸提取。將采集的樣本按照核酸提取試劑盒的說明書進行操作,通常包括樣本裂解、核酸結合、洗滌和洗脫等步驟。例如,將血液樣本離心,取上清液加入裂解液中,充分混勻后進行高溫裂解,然后加入磁珠結合核酸,經過多次洗滌去除雜質,最后用洗脫液將核酸洗脫下來。對于抗原檢測,一般需要對樣本進行適當稀釋,以減少樣本中雜質對檢測結果的干擾。
儀器準備與調試
儀器安裝
按照儀器說明書的要求,將非洲豬瘟檢測儀器放置在平穩、干燥、通風良好的工作臺上,連接好電源線和數據線。確保儀器周圍有足夠的空間,便于操作和維護。
儀器調試
打開儀器電源,進行預熱和自檢。根據儀器提示,進行參數設置,如檢測模式、檢測通道、反應溫度和時間等。例如,在核酸檢測儀器中,設置PCR反應的溫度循環參數,包括變性溫度、退火溫度和延伸溫度以及各階段的時間。對儀器進行校準,使用標準品或質控品進行檢測,確保儀器的檢測結果準確可靠。
試劑準備與加樣
試劑準備
檢查試劑的有效期、外觀和保存條件。按照試劑說明書的要求,將試劑從冰箱中取出,放置至室溫平衡。將檢測試劑從試劑瓶中取出,按照規定的比例進行稀釋或混合。例如,將酶標試劑與稀釋液按照一定比例混合,充分混勻后備用。
加樣操作
使用移液器準確吸取樣本和試劑,加入到檢測板或反應管中。加樣時要注意避免產生氣泡,確保加樣量準確。例如,在酶聯免疫吸附試驗(ELISA)中,將處理好的樣本和陰性、陽性對照品分別加入到酶標板的孔中,每孔加入量一般為100μL。加樣完成后,輕輕晃動檢測板或反應管,使樣本和試劑充分混合。
檢測過程與監控
啟動檢測
將加好樣的檢測板或反應管放入檢測儀器中,關閉儀器門,啟動檢測程序。儀器會自動按照設定的參數進行檢測,如PCR擴增、抗原抗體反應等。
實時監控
在檢測過程中,密切關注儀器的運行狀態和檢測數據。如發現儀器出現異常情況,如溫度異常、噪音過大等,應立即停止檢測,排查故障原因。對于一些需要實時觀察的檢測項目,如熒光定量PCR檢測,可以通過儀器顯示屏觀察擴增曲線,判斷檢測是否正常進行。
結果判讀與記錄
結果判讀
檢測完成后,儀器會自動生成檢測結果。根據檢測方法和試劑說明書的要求,對檢測結果進行判讀。例如,在核酸檢測中,根據Ct值(循環閾值)判斷樣本是否為陽性,一般Ct值小于規定閾值的樣本為陽性;在抗原檢測中,根據顯色反應判斷結果,出現明顯顯色的樣本為陽性。對于一些可疑結果,應進行重復檢測或采用其他檢測方法進行驗證。
結果記錄
將檢測結果準確記錄在檢測記錄表中,包括樣本編號、檢測時間、檢測方法、檢測結果等信息。同時,對檢測過程中出現的異常情況進行詳細記錄,以便后續分析和追溯。
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