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肌組織ATCC細胞培養(yǎng)

時間:2017-8-28閱讀:205
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骨骼肌ATCC細胞培養(yǎng)
1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。
2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網(wǎng)或紗布濾過,合成培養(yǎng)基加10%小牛血清培養(yǎng),為促進分化可加1%的胎汁。
3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化。明膠制備比較簡單,常用Hanks液配的0.01%明膠。 
 肌細胞培養(yǎng)
1.選新鮮受精雞卵,置溫箱中孵育(溫箱中放有水槽,以維持箱內(nèi)溫度),每日翻動一次(180度),孵育9~12天。
2.取雞胎法相間《組織培養(yǎng)和分子細胞學(xué)技術(shù)》53頁。
3.用眼科剪剪開胸腔,ATCC細胞剝出心臟,置入皿中用Hanks液漂洗1~2次。
4.小心剪除大的動靜脈,保留心室肌,用組織塊或消化培養(yǎng)法均可。
50μl    Ionomycin(鈣離子載體, 5mM)    
50μl    Lyso-Tracker Red(溶酶體紅色熒光探針)    
50次    質(zhì)粒小量抽提試劑盒    
50次    質(zhì)粒中量抽提試劑盒    
50次    酵母質(zhì)粒小量抽提試劑盒    
50次    PCR/DNA純化試劑盒    
50次    DNA凝膠回收試劑盒    
50次    哺乳動物基因組DNA抽提試劑盒    
50次    基因組DNA小量抽提試劑盒(離心柱式)    
50次    細胞凋亡-DNA Ladder抽提試劑盒    
50次    細胞凋亡-DNA Ladder抽提試劑盒(離心柱式) 
ATCC細胞   

 

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