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培養細胞不貼壁的原因和解決方法

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培養細胞不貼壁可能原因
(1)胰蛋白酶消化過度
(2)支原體污染
(3)培養瓶瓶底不干凈
(4)培養液pH值過堿(NaHCO3分解)
(5)消化液或培養液配制錯誤、過期儲存、儲存不當
(6)細胞老化(如傳代前細胞已匯合導致失去貼附性)
(7)接種細胞起始濃度太低或太高
建議解決方法
(1)縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度。
(2)分離培養物,檢測支原體。清潔支架和培養箱。如發現支原體污染,丟棄培養物。
(3)注意刷洗,或換用一次性塑料培養瓶
(4)使用無菌醋酸溶液調整pH值或充入無菌CO2(將培養液敞口放入培養箱也可)
(5)重新配置消化液或培養液
(6)啟用新的保種細胞
(7)調節接種細胞濃度

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