兔糖化血紅蛋白A1c（GHbA1c）elisa試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

 銀杏內(nèi)酯B英文名稱：Ginkgo biloba B號：15291-77-7分子式：424.39856

 銀杏內(nèi)酯C英文名稱：Ginkgo biloba C號：15291-76-6分子式：440.39796

 銀杏內(nèi)酯J英文名稱：Ginkgo biloba J號：107438-79-9分子式：424.39856

 銀杏酸(C13:0)英文名稱：Ginkgo biloba (C13:0)號：20261-38-5分子式：320.4698

 銀杏酸(C15:1)英文名稱：Ginkgo biloba (C15:1)號：22910-60-7分子式：346.5076

 銀杏酸(C17:1)英文名稱：Ginkgo biloba (C17:1)號：分子式：374.5612

 吲哚醇英文名稱：Alcohol號：2380-86-1分子式：133.15

 隱丹參酮英文名稱：Implicit Salvia號：35825-57-1分子式：296.3603

 隱綠原酸英文名稱：Chlorogenic acid號：905-99-7分子式：354.31

 柚皮甙二氫查爾酮英文名稱：Naringin two h chalcone號：18916-17-1分子式：582.55

 柚皮苷英文名稱：Naringin號：10236-47-2分子式：580.53458

 柚皮素英文名稱：Naringenin號：480-41-1分子式：272.25278

 羽扇豆醇英文名稱：Lupeol號：545-47-1分子式：426.7174

 鳶尾苷元磺酸鈉英文名稱：Tectorigenin sodium sulfonate號：548-77-6分子式：300.26

原花青素英文名稱：Primary anthocyanin號：4852-22-6分子式：594.529

 α-香附酮英文名稱：A-cyperone號：473-08-5分子式：218.33458