原代細(xì)胞越來(lái)越受廣大科研者的喜愛(ài)，但細(xì)胞的生命力不像人們想象中那么強(qiáng)大，在培養(yǎng)復(fù)蘇等過(guò)程中稍有不慎就不可能導(dǎo)致它的死亡。與此同時(shí)越來(lái)越多關(guān)于細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)客戶會(huì)選用骨髓瘤細(xì)胞。原因主要有以下兩點(diǎn)，同時(shí)選擇合適的骨髓瘤細(xì)胞必須滿足四個(gè)條件：
一、骨髓瘤細(xì)胞具有無(wú)限分裂能力,由于該細(xì)胞并非高度分化細(xì)胞,因此分裂能力較強(qiáng),而其它腫瘤細(xì)胞分裂能力較弱，因此多在制備單克隆抗體時(shí)與B淋巴細(xì)胞融合，使單克隆抗體迅速大量增殖。
二、同時(shí)骨髓瘤細(xì)胞能產(chǎn)生并分泌大量的免疫球蛋白，這樣的瘤細(xì)胞融合后，可能影響或降低所分泌抗體的滴度，所以必須選育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤細(xì)胞。
三、選擇骨髓瘤細(xì)胞的條件：①該瘤細(xì)胞系的來(lái)源應(yīng)與制備脾細(xì)胞小鼠為同一品系，以便兩者的組織相容性抗原一致；②骨髓瘤細(xì)胞必須是靜息狀態(tài)，不產(chǎn)生γ球蛋白或不分泌到細(xì)胞外；③骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)需要一個(gè)較高的細(xì)胞密度,106個(gè)細(xì)胞/ml；④生長(zhǎng)速度快，繁殖時(shí)間短。
目前常用的Balb/c小鼠產(chǎn)生的骨髓瘤細(xì)胞株有：①S194/5XXO?BU?1；②SP2／0—Ag14（簡(jiǎn)稱SP2）；③P2—X？ ?—Ag8?6?5?3（簡(jiǎn)稱653）；④FO
以653Z為常用，它是由礦物油4－甲基－15烷（Pristane，降植烷）誘發(fā)出來(lái)的一種漿細(xì)胞瘤（Minerol Oil plasmacy toma，MOPC）并經(jīng)過(guò)培育形成一株8-氮鳥(niǎo)嘌呤有抵抗力的亞系。
原代細(xì)胞一般由有關(guān)單位直接引入，保存于-195℃液氮罐中，試驗(yàn)時(shí)復(fù)蘇、增殖、傳代即可。
由于骨髓瘤細(xì)胞是半貼壁狀態(tài)，很容易脫落，因此不需要胰酶處理。為了防止出現(xiàn)返祖現(xiàn)象，在融合前，可將培養(yǎng)基內(nèi)加入15μg/ml 8－氮鳥(niǎo)嘌呤。取約1×107～6×107對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（即培養(yǎng)15h～20h）的骨髓瘤細(xì)胞，在室溫離心（400g）10min，沉淀以2.5％FCS—1640液再懸浮并計(jì)數(shù)。
鑒別    甘氨酸    對(duì)照品    110735-200102        200mg
含量測(cè)定    芍藥苷    對(duì)照品    110736-200526        20mg
含量測(cè)定    異補(bǔ)骨脂素    對(duì)照品    110738-200511        20mg
含量測(cè)定    補(bǔ)骨脂素    對(duì)照品    110739-200511        20mg
含量測(cè)定    秦皮甲素    對(duì)照品    110740-200406        20mg
含量測(cè)定    秦皮乙素    對(duì)照品    110741-200506        20mg
含量測(cè)定    熊果酸    對(duì)照品    110742-200516        20mg
原代細(xì)胞