1、人正常組織細(xì)胞初代消化培養(yǎng)法
（1）準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
（2）布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。
（3）處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。
（4）剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角燒瓶中，結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
（5）消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
（6）分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500~1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
（7）計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2~7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。
（8）培養(yǎng)：置于36.5℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。
2、初代組織塊培養(yǎng)法
（1）剪切：把組織小塊置于小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污，吸靜Hanks液，用眼科剪反復(fù)剪切1mm3塊為止。
（2）擺布：用彎頭吸管吸取若干小塊，置于培養(yǎng)瓶中，用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養(yǎng)瓶底部，小塊相互距離以0.5cm為宜，每一25ml培養(yǎng)瓶底可擺布20~30塊。
（3）輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，另瓶底向上，注意翻瓶時(shí)勿另組織小塊流動(dòng)，塞好瓶塞，置36.5℃溫箱培養(yǎng)2小時(shí)左右（勿超過(guò)4小時(shí)），使小塊微干涸。
（4）培養(yǎng)：從微箱中取出培養(yǎng)瓶，開(kāi)塞，46度斜持培養(yǎng)瓶，箱瓶底腳部輕輕注入培養(yǎng)液少許，然后人正常組織細(xì)胞緩緩再把培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，讓培養(yǎng)液慢慢覆蓋附于瓶地上的組織小塊。置溫箱中靜止培養(yǎng)。待細(xì)胞從組織塊游出數(shù)量增多后。再補(bǔ)加培養(yǎng)液。
(R)-S-(2-氨基-2-羧乙基)-L-半胱氨酸    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    L-Cystathionine    含量:    BR，90%
H-半胱氨酸-甘氨酸-OH    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    Cys-Gly    含量:    BR，98%
聚賴氨酸    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    ε-PL    含量:    BR，95%
α-糜蛋白酶    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:     α-Chymotrypsin(bovine)    含量:    USP級(jí)，1500USP u/mg
中溫淀粉酶    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    糊精化酶    含量:    BR，4000u/g
高峰淀粉酶    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    α-Amylase from Aspergillus oryzae    含量:    生物技術(shù)級(jí)，50u/mg
人正常組織細(xì)胞