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丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法檢測試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 10:27:32瀏覽次數:263次

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國產貨號 GOY-01S6604
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【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法檢測試劑盒

50管/48樣

紫外分光光度法

GOY-01S6604

商品介紹

測定意義

PKEC 2.7.1.40)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化糖酵解過程中的最后一步反應,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,也是產生ATP的關鍵酶之一,因此測定PK活性具有重要意義。

測定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脫氫酶進一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PK活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

氟酸鋅 CPp, p’-DDD標準溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:石油Anti-BRAF/FITC  熒光素標記黑素瘤相關蛋白抗體IgG

硝酸鋅,六水 AR,99%p, p’-DDD標準溶液10μg/ml,u=7%,溶劑:石油Anti-B Raf(phospho S365) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化B-Raf抗體IgG

硝酸鋅,六水 CP,98%o,p’-DDT標準溶液100μg/ml,溶劑:甲Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC  熒光素標記化B-Raf抗體IgG

硝酸鋅,六水 99.99% metals basiso,p’-DDT標準溶液 100μg/ml,u=2%Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC  熒光素標記化B-Raf抗體IgG

氧化鋅 99.999% metals basiso,p’-DDT標準溶液 10μg/ml,u=4%Anti-BRCA1(human)/FITC  熒光素標記癌易感基因1抗體(人)IgG

氧化鋅 藥典級(Ph. Eur., BP, USP, 99-100.5%)乙苯標準溶液1000ppm,基質:甲Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC  熒光素標記癌易感基因1抗體(小鼠 大鼠)IgG

,七水 AR,99.5%異標準溶液 100μg/ml,溶劑:甲(劇品)Anti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化癌易感基因1抗體IgG

,七水  99.995% metals basis乙苯標準溶液 1000μg/ml,溶劑:二硫化碳Anti-BRCA2/FITC  熒光素標記癌易感基因2抗體IgG

丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法檢測試劑盒Anti-S6PDH/FITC  熒光素標記抗6-山梨脫氫抗體IgG綿羊接觸蛋白4(CNTN4)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SAMDC/AMD1/FITC  熒光素標記S-腺苷蛋氨脫羧抗體IgG綿羊(LZM)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SARS S-protein/FITC  熒光素標記非典病表面蛋白S抗體IgG綿羊衰老關鍵蛋白5(FBLN5)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC  熒光素標記SARS抗體IgG綿羊白分化抗原CD4(CD4)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SATB1/FITC  熒光素標記核質結合區結合蛋白1抗體IgG綿羊抗白蛋白抗體(AAA)聯免疫吸附測定試劑盒  

Anti-Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC  熒光素標記化核質結合區結合蛋白1抗體IgG綿羊平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SCF/FITC  熒光素標記干生長因子抗體IgG綿羊間羥素(MN)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SCG3/SgIII /FITC  熒光素標記分泌粒蛋白Ⅲ抗體IgG綿羊表睪酮(ET)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SCN1A/FITC  熒光素標記電壓閥門鈉通道蛋白a1/癲癇相關蛋白抗體IgG綿羊生長分化因子11(GDF11)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SCN2A/FITC  熒光素標記電壓閥門鈉通道蛋白a2/癲癇相關蛋白抗體IgG綿羊糖皮質激素受體α(GRα)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SCN9A/NAV1.7/FITC  熒光素標記電壓開啟的鈉離子通道SCN9AIgG綿羊纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SCP2/NLTP/FITC  熒光素標記固攜帶蛋白2抗體IgG綿羊多巴受體D4(D4R/DRD4)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-SCP3/FITC  熒光素標記聯會復合體蛋白3抗體IgG綿羊染色盒同源物3(CBX3)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-Secretin/FITC  熒光素標記分泌素抗體IgG綿羊半糖苷β(GLβ)聯免疫吸附測定試劑盒

Anti-Secretin receptor/FITC  熒光素標記分泌素受體抗體IgG綿羊Toll樣受體9(TLR9/CD289)聯免疫吸附測定試劑盒

測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

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