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測定意義

Hg2+是水體中重要有毒重金屬離子，易被生物體吸收并且積累，能夠通過食物鏈進一步傳遞，從而造成傷害。典型的水俁病就是汞中毒的一種。

測定原理：

水樣經消化后，在酸性環境中，Hg2+能與二硫腙生成橙色絡合物，溶于，在490nm測定吸光度，即可計算Hg2+含量。

自備儀器和用品：

恒溫水浴鍋、可調式移液槍、濃硫酸、、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

載脂蛋白H抗體Human MAGED4 ELISA KitLittman 瓊脂

二腺苷核糖基轉移4抗體Human MAGEH1 ELISA Kit大黃酸 Rhein

AKIRIN2蛋白抗體Human MBD2 ELISA Kit酯（豬胰）

ADP核糖基化樣因子8B抗體Human MC3R(Melanocortin receptor 3) ELISA Kit人水通道蛋白4（AQP-4）ELISA試劑盒,

三腺苷家族蛋白2抗體Human MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA Kit人熱休克蛋白70（HSP-70）ELISA試劑盒,

AKIRIN1蛋白抗體Human MBD4 ELISA Kit小鼠甲狀旁腺相關蛋白（PTHrP）ELISA試劑盒,

錨定蛋白樣蛋白1抗體Human MARK4 ELISA Kit小鼠抗中性粒核周抗體（pANCA）ELISA試劑盒,

腺苷酸激2抗體Human MBD5(Methyl-CpG-binding domain protein 5) ELISA Kit小鼠蛋白激B（PKB）ELISA試劑盒,

水樣中汞離子（Hg2+）濃度微量法單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒進口、分裝

S100鈣結合蛋白P(S100P)免疫試劑盒進口、組裝

抗磷脂酰絲抗體(APSA)免疫試劑盒進口、組裝

Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgM)免疫試劑盒進口、分裝

B2(VB2)免疫試劑盒進口、組裝

乙醛脫氫(ALDH)免疫試劑盒進口、分裝

山羊超氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒*直銷

小鼠醛固酮(ALD)免疫試劑盒進口、組裝

兔子6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒進口、組裝

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。