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TSZelisa試劑盒中至關(guān)重要的顯色的過(guò)程

時(shí)間:2017/11/7閱讀:261
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TSZelisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的操作中有很多步驟,每一步都很重要,今天就介紹一下elisa試劑盒顯色的重要性。
   顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無(wú)色,而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)判斷。
   OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會(huì)自行變色,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
   TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺(tái)上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,TSZelisa試劑盒是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。
根皮苷    HPLC≥99%    phloridzin    20mg/支
蛻皮激素    HPLC≥98%    Ecdysterone    20mg/支
6-姜酚(姜辣素)    HPLC≥98%    6-gingerol    20mg/支
蒿本內(nèi)酯    HPLC≥90%    Z-Ligustilide    20mg/支
脫氧野尻霉素(DNJ)    HPLC≥98%    1-Deoxynojirimycin    20mg/支
劍麻皂苷元    HPLC≥98%    sisalagenin    20mg/支
檸檬苦素    HPLC≥98%    Limonin    20mg/支
諾米林    HPLC≥98%    Nomilin    20mg/支
TSZelisa試劑盒

 

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