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elisa定量檢測試劑盒受光照的影響

時間:2017/11/2閱讀:245
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elisa定量檢測試劑盒實驗的操作中有很多步驟,每一步都很重要,今天就介紹一下elisa試劑盒顯色的重要性。
顯色是ELISA中的后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯色適當縮短或延長反應時間,及時判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深,再延長反應時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應應避光進行,顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產物用酸終止后,顯色由橙黃色轉向棕黃色。
TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩定性,宜在規定的適當時間閱讀結果。TMB經HRP作用后,約40分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,elisa定量檢測試劑盒是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。
美服培酮標準品    Mifepristone     200mg    84371-65-3 
美加明相關物質A標準品        10mg    22321-23-9 
美侖孕酮醋酸酯標準品    Melengestrol Acetate     125mg    2919-66-6 
美侖孕酮醋酸酯相關物質A標準品        25mg    
美侖孕酮醋酸酯相關物質B標準品        25mg    
美羅培南標準品    Meropenem     300mg    119478-56-7 
美洛西林鈉標準品    Mezlocillin Sodium     350mg    42057-22-7 
美洛昔康標準品    Meloxicam     400mg    71125-38-7 
美洛昔康相關物質A標準品        25mg    24683-26-9 
美洛昔康相關物質B標準品        25mg    7305-71-7 
美洛昔康相關物質C標準品        30mg    118854-48-1 
美洛昔康相關物質D標準品        30mg    
美沙比妥標準品    Metharbital CIII    200mg    1950/11/3
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