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今日著重講解:ELISA試劑盒是免疫酶技術的一種嗎?

時間:2016/9/6閱讀:845
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   昨日我司錢接到浙江大學李老師的咨詢,李老師咨詢到ELISA試劑盒是免疫酶技術的一種嗎?針對這一問題,我司錢給出了詳細的講解。下面小編為大家整理出了此次講解內容,希望對大家有所幫助:
   ELISA試劑盒法是免疫酶技術的一種,其特點是利用聚苯乙烯微量反應板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應和酶促反應都在其中進行。在每次反應后都要反復洗 滌,這既保證了反應的定量關系,也避免了末反應的游離抗體/抗原的分離步驟。在法中。酶促反應只進行一次,而 抗原、抗體的免疫反應可進行一次或數次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進行免疫反應。乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。
   洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液,各種 試劑 盒的洗液不要混用。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團,也含親水基團,其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合,從而削弱蛋白質與固相載體的結合,ELISA試劑盒并借助于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質回復到水溶液狀態,從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
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