導(dǎo)讀:沃特世公司日推出了新型的Waters ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng),這是業(yè)內(nèi)首臺涵蓋納升級至微升級的UltraPerformance LC(UPLC)超液相色譜系統(tǒng),系統(tǒng)耐壓高達(dá)15,000psi。
儀表網(wǎng)訊 沃特世公司(簡稱“沃特世”,紐約證券交易所代碼:WAT)今日推出了新型的Waters ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng),這是業(yè)內(nèi)首臺涵蓋納升級至微升級的UltraPerformance LC(UPLC)超液相色譜系統(tǒng),系統(tǒng)耐壓高達(dá)15,000psi。將此系統(tǒng)與沃特世質(zhì)譜儀聯(lián)用,能夠?qū)?fù)雜樣品體系中含量極低的分子進(jìn)行鑒定和定量,提供的高靈敏度。ACQUITYUPLCM-Class系統(tǒng)可用于蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝分析、代謝物鑒定和藥代動力學(xué)研究等各個領(lǐng)域。同時,全新設(shè)計的可耐受15,000psi壓力的亞2μm色譜柱,提供更快的分離速度、更高的峰容量和靈敏度。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)在WCBP 2014研討會上亮相,這是一個以生物技術(shù)藥物分析方法為主題的學(xué)術(shù)會議。新系統(tǒng)將于今年季度開始發(fā)貨。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)
“進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)研究和生物技術(shù)藥物研發(fā)的科學(xué)家們向我們反饋,說他們經(jīng)常會遇到非常有挑戰(zhàn)的研究課題:樣品組成非常復(fù)雜,性質(zhì)相近的干擾物含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于目標(biāo)蛋白分子,要對這些極微量的關(guān)鍵蛋白質(zhì)分子進(jìn)行鑒定和定量;也需要獲得高覆蓋率的蛋白質(zhì)鑒定結(jié)果。如果沒有合適的分析工具,這將會是一個非常棘手的問題?,F(xiàn)在,有了ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng),科學(xué)家們就能夠探索未知領(lǐng)域,實現(xiàn)研究目標(biāo)。”沃特世公司總裁ArtCaputo說,“作為質(zhì)譜儀的LC接入口,這套系統(tǒng)能讓更多的科學(xué)家輕松采用微升級色譜解決為復(fù)雜的分析難題。”
納升級至微升級LC是指介于200nL/min至100μL/min的流速范圍,使用小于1.0mm內(nèi)徑色譜柱的LC系統(tǒng),其優(yōu)點包括節(jié)省樣品和溶劑、更高的分析靈敏度以及更好的電噴霧離子化質(zhì)譜(ESIMS)分析靈敏度。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)的主要創(chuàng)新在于更低的系統(tǒng)體積和全新設(shè)計的流路,保證在色譜分離過程中大程度地降低擴(kuò)散和由于吸附而造成的樣品損失。系統(tǒng)內(nèi)部流路全部使用惰性材料,可保證樣品穩(wěn)定不被改變,并大程度提高目標(biāo)生物分子的回收率。為保持峰容量,該系統(tǒng)配備了專為微升級分離而優(yōu)化設(shè)計的新型微升級ESI質(zhì)譜噴針,以及低擴(kuò)散的光學(xué)檢測流通池,以保持光學(xué)檢測的高分離度和靈敏度。憑借更高的系統(tǒng)耐壓,您可以使用更長的亞2μm顆粒色譜柱(長達(dá)250mm),達(dá)到更快的分析速度和更高的分離度。
隨著ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)的推出,沃特世還同時推出了五款內(nèi)徑從75μm至1.0mm的新型色譜柱,分別為:HSST3(1.8μm,孔徑100埃)、BEHC18(1.7μm,孔徑130埃和300埃)、BEHC4(1.7μm,孔徑300埃)、CSHC18(1.7μm,孔徑130埃)和SymmetryC18(5μm,孔徑100埃)。并且,沃特世還推出了全新的亞2μm顆粒300μm內(nèi)徑不銹鋼色譜柱系列。
利用HDX技術(shù)監(jiān)測蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)
氫氘交換質(zhì)譜(HDX-MS)用于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)動力學(xué)和構(gòu)型變化,可更好地確定它們的結(jié)構(gòu)。氘是氫的一種重同位素,因此可以通過質(zhì)譜對氘含量進(jìn)行測量或“稱重”。
科學(xué)家們使用HDX-MS研究獲得的信息對不同“狀態(tài)”的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行對比,如對比與候選藥物結(jié)合前和與結(jié)合后的構(gòu)型變化,定位藥物結(jié)合部位和結(jié)合的強(qiáng)弱。通過計算和比較氘交換水平的差別來獲得蛋白質(zhì)構(gòu)型變化的信息。HDX-MS能夠在溶液中監(jiān)測蛋白結(jié)合域相互作用情況、蛋白質(zhì)結(jié)合動力學(xué)、配體結(jié)合以及蛋白質(zhì)折疊等相關(guān)研究。
HDX-MS研究需要對蛋白質(zhì)構(gòu)型的微小變化進(jìn)行檢測,率的色譜分離對達(dá)到高品質(zhì)的數(shù)據(jù)結(jié)果至關(guān)重要。ACQUITYUPLCM-Class系統(tǒng)更高的耐壓確保了能夠在0℃對酶切肽段快速進(jìn)行LC分離和質(zhì)譜檢測。全自動HDX-MS系統(tǒng)整合了HDX-MS的所有步驟,包括全自動的氫氘交換樣品制備過程、蛋白質(zhì)序列確定、氘交換曲線以及沃特DyanmXHDX數(shù)據(jù)分析軟件。
同時發(fā)布的還有沃特世專門開發(fā)的用于用于蛋白質(zhì)“在線酶切”的UPLC色譜柱,即Waters Enzymate BEH在線Pepsin酶切柱,將HDX-MS效果提升到一個新高度。ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)與Waters SYNAPT G2-Si或Xevo G2-SQTof質(zhì)譜儀聯(lián)用,提供高質(zhì)量的圖譜和數(shù)據(jù),得到HDX-MS分析所需要的微小質(zhì)量變化。將所有這些創(chuàng)新技術(shù)組合在一起,沃特世提供了完整的且的HDX-MS分析平臺。
利用二維分離擴(kuò)展分析動態(tài)范圍
對于復(fù)雜樣品,特別是當(dāng)樣品中的目標(biāo)組分如蛋白質(zhì)、肽或小分子的動態(tài)范圍很寬時,二維LC是非常有用的策略。利用此技術(shù)能夠增加色譜峰容量,具體的操作是先通過維分離對蛋白或肽進(jìn)行分組,所得到的每一個餾分經(jīng)過富集,再通過具有不同選擇性的第二維色譜柱進(jìn)行分離。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)采用直觀易用的向?qū)Р藛芜M(jìn)行方法設(shè)置、標(biāo)準(zhǔn)化的色譜柱以及具有高重現(xiàn)性的色譜儀器有效簡化了2D-LC分離。智能化閥操作增加了樣品通量,同時大程度地提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。