ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | Bmi-1基因ELISA試劑盒免費代測 |
英文名稱 | B cell-specific MLV inte-gration site-1 |
貨號 | FS-P64813 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
P73腫瘤抑制因抗體英文全稱Classical swine fevervirus antigen英文簡稱CSFV-Ag檢測范圍7716nmol/L-
內分泌腺衍生血管內皮生長因子抗體英文全稱tissue inhibitors of metalloproteinase 2英文簡稱TIMP2檢測范圍7717nmol/L-800ng/mL
蛋白激酶樣內質網激酶抗體英文全稱Insulin-like growth factor binding protein 7英文簡稱IGFBP-7檢測范圍7718nmol/L-8ng/mL
前列腺特異膜抗原抗體英文全稱liver type fatty acid binding protein英文簡稱LFABP檢測范圍7719nmol/L-1000pg/mL
蛋白Z抗體英文全稱Neutrophil Gelatinase-associated Lipocalin2英文簡稱NGAL2檢測范圍7720nmol/L-240pg/mL
蛋白S抗體英文全稱Interleukin 5英文簡稱IL-5檢測范圍7721nmol/L-160pg/mL
肝再生磷酸酯酶2抗體英文全稱Intermedin英文簡稱IMD檢測范圍7722nmol/L-2000pg/mL
配對盒因7抗體英文全稱Follistatin英文簡稱FS檢測范圍7723nmol/L-80ng/mL
激活激酶PAK7抗體英文全稱Transmissible Gastroenteritis virus IgG antibody英文簡稱TGEV-IgG檢測范圍7724nmol/L-
孕激素誘導阻斷因子抗體英文全稱Avian Encephalomyelitis英文簡稱AE檢測范圍7725nmol/L-
piwi樣1蛋白抗體英文全稱adenoviru gI英文簡稱ADV-gI檢測范圍7726nmol/L-
泌乳素抗體英文全稱adenoviru antibody英文簡稱ADV-Ab檢測范圍7727nmol/L-
血小板源性生長因子-B抗體英文全稱Insulin-like growth factor 英文簡稱IGF檢測范圍7728nmol/L-160ng/mL
血小板源性生長因子受體A抗體(PDGFRα)英文全稱Salmonella antibody英文簡稱SA-Ab檢測范圍7729nmol/L-
血小板源性生長因子受體B抗體(PDGFRβ)英文全稱glycogen phosphorylase bb英文簡稱GPBB檢測范圍7730nmol/L-80ng/mL
酸脫氫酶激酶4抗體英文全稱heart fatty acid binding protein英文簡稱h-FABP檢測范圍7731nmol/L-20ng/mL
層粘連蛋白(LN)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)TGF-β Antibody100 ul
層粘連蛋白(LN)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)IRP2 (D6E6W) Rabbit mAb100 ul
瘦素(LEP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Phospho-ALK (Tyr1282/1283) Antibody100 ul
瘦素(LEP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Pro-TGF-alpha Antibody100 ul
瘦素(LEP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)HIF-1α Antibody100 ul
瘦素(LEP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Phospho-LSD1 (Ser131) Antibody100 ul
L選擇素(SELL)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)GNB3 Antibody100 ul
單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Pin1 Antibody100 ul
Bmi-1基因ELISA試劑盒免費代測大鼠抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Rhizopus oryzae
人碳酐酶2(CA-2)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pleurotus abalonus
鼠碳酐酶2(CA-2)ELISA Kit,48T/96T 用途: 高效發酵植酶
大鼠碳酐酶2(CA-2)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Cladosporium cladosporioides
人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Chaetomium raii
兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Lactobacillus sakei subsp. Sakei
鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit,48T/96T 用途: 教學研究
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準