ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
封閉蛋白2ELISA試劑盒免費代測 | Claudin-2 | FS-P65225 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
無胸腺癥相關蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關鍵因6抗體產品別名: 異喹啉-N-氧化物利福昔明(標準品)
朊蛋白DPL抗體產品別名: 9-芴酮腙利可君(標準品)
肌強直性營養不良蛋白激酶抗體產品別名: 4-丁氧-2,3-二氟苯酚利拉萘酯(標準品)
有絲分裂控制蛋白dis3抗體產品別名: 內向-9-甲-9-氮雜雙環[3,3,1]壬烷-3-鹽鹽利魯唑(標準品)
肝癌新因3蛋白抗體產品別名: 鈷銨六水合物利培酮(標準品)
Dapper2蛋白抗體產品別名: 2-溴-4'-苯乙酰苯利塞膦(標準品)
Dapper3蛋白抗體產品別名: 2,6-二-N-苯苯利塞膦鈉(標準品)
背神經管核蛋白抗體產品別名: 4,6-二甲氧-2-甲嘧啶利托那韋(標準品)
雙甲精氨水解酶1抗體產品別名: 3-羥-2'-甲-2-萘苯聯苯芐(標準品)
絲氨/蘇氨蛋白激酶DCAMKL1抗體產品別名: 2-羥-7-萘磺鈉聯苯芐唑(標準品)
唐氏綜合征粘附分子抗體產品別名: 2,3-二羥萘-6-磺鈉聯苯雙酯(標準品)
磷脂磷酶HTPAP抗體產品別名: 雙芬鏈脲佐菌素(標準品)
穿膜蛋白DLK1抗體(C端)產品別名: 2-氨-4-溴苯甲甲酯兩性霉素B(標準品)
二氫葉還原酶樣1抗體產品別名: 一頻哪酮鄰苯二甲(標準品)
脫氧尿苷三磷酶DUT抗體產品別名: 2-氨-3-溴吡啶鄰甲苯磺酰(標準品)
封閉蛋白2ELISA試劑盒免費代測Human F13B(Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit糙孢籃狀菌拉丁屬名: Talaromyces trachyspermus
Human EPHA1(Ephrin Type A Receptor 1) ELISA Kit大球蓋菇用途: 食用
Human F7(Coagulation Factor VII) ELISA Kit韓國鞘氨單胞菌拉丁屬名: Sphingomonas koreensis
Human ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) ELISA Kit*正紅菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human EPHA10(Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human EPYC(Epiphycan) ELISA Kit多汁乳菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit淺黃微桿菌拉丁屬名: Microbacterium flavescens
Human EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit榛針孢酵母拉丁屬名: Nematospora coryli
Human ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) ELISA Kit腸膜明串珠菌腸膜亞種拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides
Human ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit乳桿菌屬拉丁屬名: Lactobacillus sp.
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準