大鼠成骨細胞公司正在出售的產品：漢黃芩素 632-85-9 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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新芒果苷 6480
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 大鼠成骨細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X0996 |
商品介紹：
名稱 大鼠成骨細胞 2.組織來源：顱骨組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠成骨細胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結構，構成面部的支架，共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域，分泌酸性物質溶解礦物質，分泌消化骨基質，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細胞移行至被吸收部位，分泌骨基質，骨基質礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎，也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。 5.方法簡介： ()實驗室分離的大鼠成骨細胞采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的大鼠成骨細胞經ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R091 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25% 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
1 mg Rhod-2，三鈉鹽 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人表皮調節素(EPR/EREG)ELISA試劑盒
250mL Carbonate Buffer（鹽緩沖液）,0.5M,pH9.5 Carbonate Buffer,0.5M,pH9.5 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Serpin B6
25mL 親和硅烷 Binding Silane 常溫 78-5000 pg/m
大鼠成骨細胞腸球菌顯色培養基 1000ml
CD86/B7-2 CD86抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗小鼠IgM 規格: 0.1ml
C3orf17 3號染色體開放閱讀框17抗體 規格: 0.2ml
C10orf88 10號染色體開放閱讀框88抗體 規格: 0.2mlHE4 附睪分泌蛋白4抗體 規格: 0.2ml
Phospho-IRF7 (Ser471/472) 磷酸化干擾素調節因子7抗體 規格: 0.1ml
Phospho-Dab1 (Tyr220) 磷酸化Disabled 1抗體 規格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗人IgM 規格: 0.1ml
SIRT5 沉默調節蛋白5抗體 規格: 0.2ml
SEPT1 細胞分化蛋白SEP1抗體 規格: 0.2ml
TTC23 宮頸原基因8抗體 規格: 0.2mlCytokeratin 13/CK-HMW 高分子量細胞角蛋白抗體 規格: 0.1ml
50次 玻璃珠法柱式酵母DNAout
