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50次 流感嗜血桿菌檢測試劑盒(熒光PCR法)

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  • 更新時(shí)間2021-11-20
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限10
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9346
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流感嗜血桿菌檢測試劑盒50次

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同類產(chǎn)品

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規(guī)格50次 貨號(hào)YS-P013800 品牌YSRIBIO
流感嗜血桿菌檢測試劑盒(熒光PCR法)原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
流感嗜血桿菌檢測試劑盒(熒光PCR法) 產(chǎn)品詳情

服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

流感嗜血桿菌檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

YS-P013800

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
QQ截圖20191211135002.jpg

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對(duì)原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

兔甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶1(MASP1)雙[2-(2-并惡唑)酚]鋅(II)(>95.0%(T))凋亡相關(guān)蛋白7抗體

兔粘蛋白17(MUC17)酞菁銅(II)(α-型)(>90.0%(T))調(diào)亡誘導(dǎo)因子家族蛋白PEF1抗體

兔脾臟酪氨酸激酶(SYK) 酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))脂滴包被蛋白A+B抗體

兔角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰酶(TGM1)(1,10-菲咯啉)三[4,4,4-三氟-1-(2-噻吩)-1,3-丁二酮]銪(III)(>98.0%(T))調(diào)亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白/多巴受體相互作用蛋白4抗體

兔補(bǔ)體C5轉(zhuǎn)化酶(C5c) 三(8-羥喹啉)鋁(>98.0%(T))小鼠抗萊克多巴單克隆抗體

兔鞘脂激活蛋白原(PSAP)氯化三(2,2'-聯(lián)吡啶)釕(II)六水合物(>98.0%(T))PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白抗體

兔單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13) 三(1,3-二-1,3-二酮)(1,10-鄰二氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))嘌呤受體P2X7抗體

兔毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變因子(ATM) 三(2-吡啶)合銥(III)(升華精制)(>90.0%(HPLC))三磷酸腺苷受體受體P2X1抗體

兔軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)三(8-羥喹啉)鋁(升華提純)(>98.0%(T))三磷酸腺苷受體P2X5抗體

兔抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA) 三(酰酮根)合銥(III)三磷酸腺苷受體P2X5b抗體

兔轉(zhuǎn)錄激活因子-4(ATF-4) 三[1-異喹啉-C2,N]銥(III)(升華精制)(>99.0%(HPLC))三磷酸腺苷受體P2X6抗體

兔去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2)2,5-雙(4-二氨)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(T))突觸富含脯氨酸膜蛋白7抗體

兔多效生長因子(PTN)2,5-雙(5-叔丁-2-并惡唑)噻吩(>98.0%(HPLC)(N))過氧化物酶體生成蛋白5相關(guān)蛋白抗體

兔延伸蛋白A(EloA) 4,4-雙(5--2-并惡唑)二烯(>98.0%(N))G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y6抗體

兔組織轉(zhuǎn)谷氨酰酶(TGM2)2-(4-叔丁)-5-(4-聯(lián))-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC))前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2抗體

兔表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)1,1-雙[4-[N,N-二(對(duì))氨]]環(huán)己烷(>98.0%(N))G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y11抗體
流感嗜血桿菌檢測試劑盒(熒光PCR法)IKK beta /FITC  熒光素標(biāo)記核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgG十七烷 GR,99%

phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG十七烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)

phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG2,5-己二酮 standard for GC, ≥99% (GC)

phospho-IKK alpha (Thr23) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG正庚烷 for HPLC, ≥98%(GC)

phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgG正庚烷 for HPLC, ≥99%(GC)

phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG二十一烷 AR,90%

phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgG二十一烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)

Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制劑抗體IgG二十一烷  >99.0%(GC)
反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。


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