參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：流感嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：YS-P013370
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．公司產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
小鼠接觸蛋白1(CNTN1)硫酸鋁十二水(>99%,BR)胰輔脂酶抗體
小鼠接觸蛋白2(CNTN2)鋁粉(>99%,BR)19號(hào)染色體開放閱讀框45抗體
小鼠接觸蛋白3(CNTN3)丁卡那霉素?zé)o水過氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體
小鼠皮質(zhì)酮(CORT)氨茶堿(>98%,BR)核因子NFκB激活蛋白1抗體
小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)ELISA kit酸銨三水(>99%,BR)第12號(hào)染色體開放閱讀框23抗體
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)檸檬酸鉍銨γ-連環(huán)素/連接蛋白γ抗體
小鼠C肽(C-P) 硫酸氫銨(>98%,BR)10號(hào)染色體開放閱讀框4抗體
小鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)溴化銨(>99%,BR)10號(hào)染色體開放閱讀框47抗體
小鼠線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)氟酸銨(>98%,BR)10號(hào)染色體開放閱讀框81抗體
小鼠線粒體肌酸激酶1B(CKMT1B)氟化氫銨(>98%,BR)19號(hào)染色體開放閱讀框47抗體
小鼠肌肉肌酸激酶(CKM)化銨(>99%,BR)19號(hào)染色體開放閱讀框54抗體
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)十二水合硫酸鐵銨(>98%,BR)N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1抗體
小鼠I型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXΙ)鉬酸銨四水19號(hào)染色體開放閱讀框18抗體
小鼠α-骨膠原交聯(lián)(α-CTx)硫酸鎳銨六水(>98%,BR)19號(hào)染色體開放閱讀框21抗體
小鼠I型前膠原C末端肽(CICP)磷鉬酸銨(>96.5%,BR)19號(hào)染色體開放閱讀框24抗體
小鼠隱花色素1(CRY1)磷酸氫銨鈉(>98%,BR)Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體
流感嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒E1 glycoprotein 風(fēng)疹病糖蛋白抗體雙環(huán)己酮草酰二腙 98.0%
GM-CSF 粒-巨噬克隆激因子抗體 AR，99.5%
GM-CSFR alpha/CD116 粒-巨噬集落激因子受體α抗體二硫化碳 ACS, ≥99.9%
GM-CSFR Beta 粒-巨噬集落激因子受體β抗體二硫化碳 for HPLC, ≥99.9%
Fx1A 腎刷狀緣抗體銅片 AR,99.5% metals basis
GP65/SDFR1/NPTN 間質(zhì)衍化因子受體1抗體化鎘 AR,99.5%
GPA33 糖蛋白A33抗體次氯酸鈣 technical grade
GNLY/NKG5 顆粒溶素抗體線狀氧化銅 AR
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
