薄層色譜斑點的檢出展開后的薄層板經過干燥后，常用紫外光燈照射或用顯色劑顯色檢出斑點。對于無色組分，在用顯色劑時，顯色劑噴灑要均勻，量要適度。紫外光燈的功率越大，暗室越暗，檢出效果就越好。

 

    展開分離后，化合物在薄層板上的位置用比移值(Rf值)來表示。化合物斑點中心至原點的距離與溶劑前沿至原點的距離的比值就是該化合物的Rf值。

 

    薄層色譜的注意事項：

 

    (1)有些溶劑，如氯仿或乙醚，常摻入痕量乙醇作為保護劑，使用前應將其蒸餾除去，否則不能得到重復的色譜圖。

 

    (2)在不同的環境中保存的不同溶劑，水含量差別很大，特別是許多溶劑是親水的，會受到環境濕度的影響，最好將其貯存在干燥器中。

 

    (3)要防止溶劑在貯存過程中受到污染.其中有些會自動氧化，右些則因貯器密封不好，受到大氣污染物的污染。污染程度與貯存條件及貯存時間有關。

 

    (4)移動相和镕質相互作用會改變色譜行為，而溶劑中的雜質有時會參與這種相互作用。

 

    (5)混合移動相中的各種溶劑也會相互作用。如果溶劑不純或各批混合溶劑組成不同，混合物的性質就可能改變。

 

    (6)薄層色譜混合溶劑在展開過程中可能發生分層現象，這種現象通常在弱溶劑和少量強溶劑混合時遲到。一段開始階段優先吸附強溶劑，于是前沿就是100%的弱溶劑了。這種吸附劑被強溶劑飽和后，會出現由混合溶劑組成的策二個前沿。