PCR儀溫度檢定系統(tǒng) PCR儀升降溫速率均勻性校準 pcr儀溫度校準

在分子生物學(xué)實驗室中，PCR儀被譽為基因研究的“心臟”，其溫度控制的精確度直接決定了實驗結(jié)果的可信度。一次錯誤的溫度循環(huán)可能導(dǎo)致假陰性或假陽性結(jié)果，甚至使數(shù)天的實驗功虧一簣。

PCR技術(shù)通過精確的溫度循環(huán)實現(xiàn)DNA擴增，每個循環(huán)包括變性、退火和延伸三個階段，溫度控制的微小偏差都會導(dǎo)致擴增效率降低甚至失敗。

《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準規(guī)范》明確要求對PCR儀的溫度示值誤差、溫度均勻性、平均升溫速率、平均降溫速率等關(guān)鍵參數(shù)進行定期校準1。實驗證明，僅0.5℃的溫度偏差就可能導(dǎo)致擴增效率下降20%，使定量結(jié)果**不可靠。

校準規(guī)范

《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準規(guī)范》中提出對聚合酶鏈反應(yīng)分析儀的計量特性包括溫度示值誤差、溫度均勻性、平均升溫速率、平均降溫速率、樣本示值誤差和樣本線性。校準裝置包括精密溫度傳感器（通常為15個）和數(shù)據(jù)采集分析模塊，測溫范圍0-120℃，不確定度小于等于0.1℃。

如何判定PCR儀

（一）、溫度準確性

溫度準確性是PCR儀重要的性能指標，如溫度準確性低可直接造成非特異性擴增，甚至是錯誤的擴增結(jié)果，造成假陽性和假陰性。
市場上各家廠商考核基因擴增儀（PCR儀）性能的主要指標，一般廠家的企業(yè)指標為±0.5℃，一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度準確度為±0.3℃。故需對PCR儀控溫準確度進行測試。校準實驗平均溫度的計算公式為：I—參加檢測的溫度探頭序號；n—參加檢測的溫度探頭的數(shù)量

（二）、溫場均勻性

由于PCR儀加熱不均勻，導(dǎo)致PCR儀上各孔存在一定溫差。造成試驗結(jié)果偏差。一般PCR儀邊緣點的溫度低于中間區(qū)域，所以均勻性為PCR儀重要的性能指標。一般廠家的企業(yè)指標規(guī)定均勻性為±0.5℃，一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度均勻度為±0.3℃。校準實驗時，通過選取孔板中16個特殊反應(yīng)位置來測量溫度，并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個探頭在同一時刻max溫度與min 溫度的差值。

（三）、升降溫速率

PCR擴增產(chǎn)物數(shù)量的多少決定了PCR的效率。為了在短時間內(nèi)獲得盡可能多的產(chǎn)物，需要儀器在升降溫段具有按照預(yù)設(shè)升降溫速率快速升溫和降溫的能力（max-升溫速率達15~20℃）。一個完整的PCR過程，是由若干個升溫→恒溫→降溫循環(huán)構(gòu)成的。因為“變性”，“退火”和“延伸”3個階段是必須要***的。因此，只有使升降溫的過程盡可能地迅速，才能縮短每個PCR循環(huán)以及整個PCR 過程所需時間。一般廠家的企業(yè)指標規(guī)定升溫速率為±3℃/sec。
儀器校準實驗時，升溫速率為溫度從40℃到90℃的時間；降溫速率為溫度從70℃到35℃的時間。

（四）、max-超調(diào)溫度

超調(diào)溫度過大同樣會對試驗產(chǎn)生影響，所以校準實驗時，需要計算max-超調(diào)溫度和平均超調(diào)溫度。

PCR儀溫度檢定系統(tǒng) PCR儀升降溫速率均勻性校準 pcr儀溫度校準：

pcr儀溫度校準裝置是合肥智測電子有限公司自主研發(fā)的針對PCR儀溫度測試和校準應(yīng)用的專業(yè)性、系列化產(chǎn)品，符合國標《JJF 1527-2015 聚合酶鏈式反應(yīng)分析儀校準規(guī)范》。

智測電子pcr儀溫度校準裝置符合《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準規(guī)范》，由精密測溫探頭、高精度測溫儀1611A和數(shù)據(jù)采集軟件組成。產(chǎn)品采用創(chuàng)新的一體化設(shè)計，在滿足高精度溫度采集的同時輕巧便攜，可對國內(nèi)外PCR儀器廠商不同型號、不同孔數(shù)（384/96/60/48/32/16/8/單孔等）的PCR儀器進行溫度實時采集和校準，滿足計量校準機構(gòu)、生物實驗室、儀器廠商對PCR儀溫度測試和校準的需求。

智測電子還提供ZCTB系列高精度智能恒溫槽、PCR專用校準等溫塊、二等標準溫度計等裝置可以對測溫探頭進行校準，整套方案保障溫控探頭的精度。ZCTB校準智能恒溫槽滿足國家計量檢定規(guī)程的要求，具有溫度掃描功能、上升和保持功能及自動大功率加熱/制冷控制功能等，有優(yōu)異的溫場穩(wěn)定性和均勻性，升降溫速率快，噪音小。

產(chǎn)品特點

1、多路檢測，高速采集。系統(tǒng)配備高精度測溫儀1611A，采集速度可達10ms/通道。

2、探頭響應(yīng)速度快，長期穩(wěn)定性佳，符合ITS-90國際標準，均可溯源，滿足規(guī)程JJF1527-2015校準規(guī)范的0.1℃精度要求。

3、測溫儀支持兩種供電方式，既可充電又可插電，方便實驗室和到現(xiàn)場使用。

基因擴增儀溫度校準裝置 多通道PCR溫度計

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