比色計的工作原理是基于顏色相減混合匹配原理。羅維朋比色計目鏡筒的光學系統將光線折射成90°并將觀察視場分成可同時觀察的左右兩個部分，其中一部分是觀察樣品色的視場;另一部分是觀察參比色(即 羅維朋色度單位標準濾色片)的視場。適當選擇濾色片組合以達到與被測樣品顏色的匹配，此時儀器顯示的羅維朋濾色片量值即為被測樣品的測量結果。
比色計使用方法：
接通電源使儀器穩定，使用前至少要讓燈預熱5min;
選擇一種同底物顏色互補的濾光器;
調零(用空白對照調零);
調整靈敏度;
分析樣品及標準溶液;
由于不同比色杯的吸光特性、杯壁厚度不同，因此為了提高度，同一試驗應用同一比色杯，且在比色槽中擺放的方位相同;
每次測樣前清洗比色杯;
經常重復測定同一溶液檢驗比色計的可重復性;
用標準溶液繪制標準曲線。由于大多數過濾器過濾出來的光的波帶很寬，因而比色計既不能用于確定某種復合物，也無法分辨在混合液中吸收特性非常相近的兩種物質。比色計所用光電管的變化系數為0.5%左右，因而不適合要求具有高度性的工作。使用這種zui簡單的儀器，由于儀表上對數測量刻度單位的隨意性，即使是把表上的靈敏度/刻度調節到零控點，在一個儀器上獲得的值不可直接同另一臺儀器上測得的值相比較，同一儀器的不同設置之間也不可直接比較。比色計對于特定波長的量化工作是不合適的。
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