細胞轉染(Transfection)是指將外源性基因(如 DNA、RNA、蛋白質等)導入到細胞內的技術。轉染的目的是產生重組蛋白,或特異性增強或抑制轉染細胞中的基因表達。隨著基因和蛋白功能的深入研究,轉染已經成為科研實驗中常用的技術手段之一。研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。在實驗過程中根據導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短,可以分為瞬時轉染和穩定轉染。那么在細胞轉染中瞬時轉染與穩定轉染有什么區別?一起來學習一下吧!
瞬時轉染(transient transfection):指將構建好的質粒通過某種方式導入到哺乳動物細胞內,該質粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。細胞中瞬時轉染的外源基因表達時間有限,通常僅持續幾天,直到外源基因在細胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動子和其他調控元件的分析。目前,由于各種轉染試劑的發明,哺乳動物細胞的瞬時轉染已經用于生產具有適當折疊和翻譯后修飾的重組蛋白。
穩定轉染(Stable transfected):外源DNA整合到細胞基因組中或作為附加體質粒保留在細胞中。與瞬時轉染不同,穩定轉染能夠整合到宿主基因組,因此轉染細胞及其子代細胞的基因組中會同時保留轉染的DNA。由于穩轉效率較低,因此選用有效地轉染策略和篩選方法很重要。
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