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液相色譜使用要求快來看看吧!

來源:賽默飛色譜及痕量元素分析   2023年04月18日 16:27  
  液相色譜,在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。此時,玻璃管的上端立即出現(xiàn)幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖洗,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動,并逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶,繼續(xù)沖洗就可分別接得各種顏色的色素,并可分別進行鑒定。是利用混合物在液-固或互不相溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離而后分析鑒定的儀器,應用極其廣泛。此種儀器在使用過程中,難免會出現(xiàn)各種各樣的問題,并將直接影響到所測數(shù)據(jù)的準確性和儀器的正常工作。因此,在使用維護過程中,對液相色譜儀的要求:
 
  1.流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。
 
  2.流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使用。
 
  3.不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
 
  4.使用緩沖溶液時,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
 
  5.長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
 
  6.每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
 
  7.C18柱不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
 
  8.堵塞導致壓力太大,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
 
 ?、僖援惐甲魅軇_洗;
 
 ?、诜旁诋惐贾虚g用超聲波清洗;
 
 ?、塾?0%稀硝酸清洗;
 
  9.氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。
 
  10.如果進液管內不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
 
  11.要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
 
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