一、HPLC的日常操作條件
溫度：10～30℃；相對濕度<80％；是恒溫、恒濕，遠離高電磁干擾、高振動設備，有良好的通風設施。
二、HPLC的環境設置：
HPLC用水可以通過以下幾個方面來得到：
1專門的純水機或超純水機；
2去離子水重蒸；
3二次或三次重蒸水；
4采用類似家用的純水機；
5市場上瓶裝的純凈水或蒸餾水；
6其它途徑；
不管采用何種途徑，配制流動相應用新鮮水，水質越高放置時間越短。理想的HPLC用水應為18.2Ω的超純水，并通過0.22um的濾膜，除去熱源、有機物、無機離子及空氣等。
三、HPLC六通閥進樣器的使用及保養
六通閥進樣器是高效液相色譜系統中的進樣器，它是由圓形密封墊(轉子)和固定底座(定子)組成。美國Rheodyne公司的六通閥進樣器通用，各大HPLC儀器制造商均以此產品作為儀器的進樣器。
四、工作原理
手柄位進樣(Load)位置時，樣品經微量進樣針從進樣孔注射進定量環，定量環充滿后，多余樣品從放空孔排出；將手柄轉動至進樣(Inject)位置時，閥與液相流路接通，由泵輸送的流動相沖洗定量環，推動樣品進入液相分析柱進行分析。
雖然六通閥進樣器具有結構簡單、使用方便、壽命長、日常無需維修等特點，但正確的使用和維護將能增加使用壽命，保護周邊設備，同時增加分析準確度。如使用得當的話，六通閥進樣器一般可連續進樣3萬次而無需維修。
手柄處于Load和Inject之間時，由于暫時堵住了流路，流路中壓力驟增，再轉到進樣位，過高的壓力在柱頭上引起損壞，所以應盡快轉動閥，不能停留在中途。在HPLC系統中使用的注射器針頭有別于氣相色譜，是平頭注射器。一方面，針頭外側緊貼進樣器密封管內側，密封性能好，不漏液，不引入空氣；另一方面，也防止了針頭刺壞密封組件及定子。六通閥進樣器的進樣方式有部分裝液法和*裝液法兩種。使用部分裝液法進樣時，進樣量最多為定量環體積的75％，如20μl的定量環最多進樣15μl的樣品，并且要求每次進樣體積準確、相同；使用*裝液法進樣時，進樣量最少為定量環體積的3至5倍，即20μl的定量環最少進樣60至100μl的樣品，這樣才能*置換樣品定量環內殘留的溶液，達到所要求的精密度及重現性。推薦采用100ul的平頭進樣針配合20ul滿環進樣。可根據進樣體積的需要自已制作定量環，一般不要求精確計算定量環的體積，譬如，一根名義上10μl的定量環，實際是9μl還是1lμl并不重要，因為被測樣品和校正樣品的進樣體積保持一致，在計算結果時誤差都被抵消了。
進樣樣品要求無微粒和能阻死針頭及進樣閥的物質，樣品溶液均要用0．45μm的濾膜過濾。防止微粒阻塞進樣閥和減少對進樣閥的磨損。為防止緩沖鹽和其它殘留物質留在進樣系統中，每次結束后應沖洗進樣器，通常用不含鹽的稀釋劑、水或不含鹽的流動相沖洗，在進樣閥的Load和Inject位置反復沖洗，再用無纖維紙擦凈注射器針頭的外側。
五、泵的保養
使用流動相盡量要清潔；
進液處的砂芯過濾頭要經常清洗；
流動相交換時要防止沉淀；
避免泵內堵塞或有氣泡；
每次分析結束后，要反復沖洗進樣口，防止樣品的交叉污染；
六、柱的保養
柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強烈震動；
當柱子和色譜儀聯結時，閥件或管路一定要清洗干凈；
要注意流動相的脫氣；
避免使用高粘度的溶劑作為流動相；
進樣樣品要提純；
嚴格控制進樣量；
每天分析工作結束后，要清洗進樣閥中殘留的樣品；
每天分析測定結束后，都要用適當的溶劑來清洗柱；
若分析柱長期不使用，應用適當有機溶劑保存并封閉；
七、紫外燈的保養
在分析前、柱平衡得差不多時，打開檢測器；在分析完成后，馬上關閉檢測器。
樣品池要保養
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