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紫外可見分光光度計(jì)蛋白檢測優(yōu)缺點(diǎn)分析
優(yōu)點(diǎn):對于各種蛋白質(zhì)呈色基本相同,特異性和準(zhǔn)確度好,精密度好,呈色穩(wěn)定性好,試劑單一,方法便捷、快速不消耗樣品,測定后仍能回收利用。
缺點(diǎn):準(zhǔn)確度較差,干擾物質(zhì)多,在用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定蛋白質(zhì)含量時(shí),對那些與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)氨基酸含量差異大的蛋白質(zhì),有一定的誤差。故該法適用于測定與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)氨基酸組成相似的蛋白質(zhì)。若樣品中含有嘧啶及核酸等吸收紫外光的物質(zhì)會出現(xiàn)較大的干擾。核酸的干擾可以通過查校正表,再進(jìn)行計(jì)算的方法,加以適當(dāng)?shù)男U5且驗(yàn)椴煌牡鞍踪|(zhì)和核酸的紫外吸收是不相同的,雖然經(jīng)過校正,測定的結(jié)果還是存在一定的誤差,此外,進(jìn)行紫外
吸收法測定時(shí),由于蛋白質(zhì)吸收高峰常因PH的改變而有變化,因此要注意溶液的PH值,測定樣品時(shí)的PH要與測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的PH相一致。
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