周青，錢美圓，仇文軍，徐波

應用技術研究中心

準備好樣品，設定好分離方法，選好色譜柱，確認檢測波長，OK！開始制備純化吧~實驗員小周熟練地開始了一個新樣品的制備純化工作，一切看起來按部就班，盡在掌握。等等，這個峰信號似乎有點偏弱啊？怎么回事？蛋白質的zui大吸收波長不都是在280nm么？

小周滿臉疑惑地跑去請教實驗室大咖老徐。老徐看了看小周的分離方法，又問了一些關于蛋白樣品的信息，慢悠悠地說：“蛋白質的檢測波長一般是280nm沒錯，但前提是蛋白質系列中有較多帶有芳香環類的氨基酸殘基，你這個蛋白樣品系列未知，zui大吸收波長就不一定是280nm，你掃過紫外光譜沒有？”小周搖搖頭，表示實驗室的紫外分光光度計壞了，暫時用不了。“這樣啊，別著急，傳授你一個新招兒，看好了，”老徐麻利地在iPad上點了幾下，讓小周再進一針樣品，小周不明覺厲地照做了，“好了，樣品的zui大吸收波長找到了，是210nm左右，你下次就以210nm作為檢測波長再嘗試制備吧，”老徐留下幾句話就飄走了。接下來，小周的實驗就順利多了，他很快就拿到了目標產物，又開始了后續的實驗。

雖然只是實驗室的一個小插曲，但這個故事告訴我們：三泰科技又憋出新招了——全波段掃描功能。這個功能非常實用，一個常見的應用場景就是未知吸收波長的化合物的制備純化，有了全波段掃描功能的助力，我們就無需事先利用分光光度計對樣品進行掃描，直接在SepaBeanTM machine系統里進行上樣純化，在分離過程中通過實時監控洗脫峰的全波段掃描圖譜，及時修正儀器的檢測波長，從而地完成分離純化任務。

上述蛋白純化案例的具體實驗參數如表1所示：

表1. 蛋白樣品的分離純化實驗參數設置

修正檢測波長前及修正后的蛋白樣品分離圖譜如圖1和圖2所示：

圖1. 檢測波長280nm下的蛋白樣品分離圖譜。

圖2. 檢測波長215nm下的蛋白樣品分離圖譜。

全波段掃描功能的應用范圍遠遠不止于上述情形，例如，在分離純化這樣的一組混合物樣品時，混合物里每個組分的zui大吸收波長都不相同，對于事先確定的檢測波長來說就顯得不太適用，此時我們就可以通過實時監控洗脫峰的全波段掃描圖譜并及時修正檢測波長，實現的目標峰收集。后續我們實驗室會推出更多此類案例的應用文章，敬請期待和保持關注！

文中所用蛋白純化柱訂購信息如下表所示：

表2. SepaFlash® HP Bio C18系列反相柱參數

（填料:High efficiency spherical C18, 20-45μm, 300Å）