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人elisa定量檢測試劑盒實驗步驟

來源:上海撫生實業(yè)有限公司   2017年11月15日 14:04  

人elisa定量檢測試劑盒實驗步驟
實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進冰槽里融化。然后進行下列操作。
 一、 樣品準備
1. 準備好 25cm2細胞培養(yǎng)瓶或 60mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞(5 X 106細胞)
2. 小心加入 xx 毫升預冷的 SBJ 清理液(試劑 A),覆蓋生長表面
3. 小心抽去清理液
4. 使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞
5. 加入 xx 毫升 SBJ 清理液(試劑 A),混勻細胞
6. 移入到預冷的 15 毫升錐形離心管(注意:懸浮細胞從這一步驟開始)
7. 放進 4℃臺式離心機離心 5 分鐘,速度為 300g
8. 小心抽去上清液
9. 加入 xx 微升S B J   裂解液(試劑 B),充分混勻
10.轉(zhuǎn)移到預冷的 1.5 毫升離心管
11.強力渦旋震蕩 15 秒
12.置于冰槽里孵育 30 分鐘
13.放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘,速度為 16000g(或 13000RPM)
14.小心移取 500 微升上清液到新的預冷的 1.5 毫升離心管
  15.移取 2  微升進行蛋白定量測定
16.即刻放進-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作
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