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液相色譜儀始于理論 創于技術壯大于質量

   2017年09月20日 10:02  
  液相色譜儀始于60年代前,但是真正被大眾所注意的時候已經是60年代后期,不管是理論還是技術,那是一個具有標志性的年代。液相色譜儀開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜儀法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。液相色譜儀法是在經典液相色譜儀法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜儀法的區別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜儀法。又因分析速度快而稱為高速液相色譜儀法。也稱現代液相色譜儀。
 
  液相色譜儀的指標很多,有泵的、檢測器的、色譜柱等等。我們認為要看主要技術指標,根據國家標準,儀器的主要指標有噪音,漂移,zui小檢測濃度,定性定量重復性等。這些指標都要放在系統,回路里去看,去比較。就是需要把各單元裝置都要聯接好,如接好色譜柱,進樣閥,并且要通上流動相。因為您在分析中也都是聯接好以后才可以進行分析的,而不是單單用個檢測器或是泵的。 液相色譜儀法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜儀法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。液相色譜儀法是在經典液相色譜儀法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜儀法的區別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜儀法。又因分析速度快而稱為高速液相色譜儀法。也稱現代液相色譜儀。
 
  液相色譜儀法以液體為流動相常見的有以下幾種:
 
  1.高壓:液相色譜儀法以液體為流動相(稱為載液),液體流經色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150~350×105Pa。
 
  2. 高速:流動相在柱內的流速較經典色譜快得多,一般可達1~10ml/min。液相色譜儀法所需的分析時間較之經典液相色譜儀法少得多,一般少于 1h 。
 
  3. :近來研究出許多新型固定相,使分離效率大大提高。
 
  4.高靈敏度:液相色譜儀已廣泛采用高靈敏度的檢測器,進一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測器靈敏度可達10-11g。另外,用樣量小,一般幾個微升。
 
  5.適應范圍寬:氣相色譜法與液相色譜儀法的比較:氣相色譜法雖具有分離能力好,靈敏度高,分析速度快,操作方便等優點,但是受技術條件的限制,沸點太高的物質或熱穩定性差的物質都難于應用氣相色譜法進行分析。而液相色譜儀法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發性的限制。對于高沸點、熱穩定性差、相對分子量大(大于 400 以上)的有機物(這些物質幾乎占有機物總數的 75% ~ 80% )原則上都可應用液相色譜儀法來進行分離、分析。 據統計,在已知化合物中,能用氣相色譜分析的約占20%,而能用液相色譜儀分析的約占70~80%。
 
  通過逐漸改變液相色譜儀分析條件,在保證物質分離度的前提下,讓難流出的物質加速流出,以提高分析效率的方法;不同點,程序升溫只能從低柱溫逐步升高,只能改變升溫的速率,而梯度洗脫可以使用多種溶劑,采用復雜的比例變化來達到滿意的分離效果,更靈活 4,應該是:減小填料粒徑,增加色譜柱長,使用盡量大小均一、外型規則的填料,使用合適的流速,使用合適的流動相組成,使用合適的固定相。不能依靠理論塔板數來判斷分離的可能,理論塔板數描述的是液相色譜儀柱柱效,塔板數越高,說明色譜柱的分離性能越好(一個寬泛的概念),但具體到某些物質能否互相分離,液相色譜儀應該用分離度來描述,兩個物質的分離度大于1.5,說明能互相分離,否則就不能,這個跟理論塔板數毫無關系.

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