臨床ELISA試劑盒測定現通常為選用手工操作的以微孔板條為固相的測定形式，測定操作十分簡略，通常涉及到標本的搜集保留、試劑預備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、成果判別和成果陳述及解說等方面，其間任一過程的不妥都會影響測定成果，且尤以加樣、溫育和洗板等過程為甚。現分述一下臨床標本的搜集和保留。

用于ELISA試劑盒測定的臨床標本zui為常用的是血清（漿），有時由于特定的檢查意圖，也用到唾液、腦脊液、尿液、大便等標本。現在臨床上運用血清標本測定的標志物通常有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和醫治藥物等。對用于激素和醫治藥物測定的血清標本的搜集，要留意搜集時刻甚或體位有也許會對測定成果發生影響。如可的松在早晨4～6點之間，會有一峰值呈現：生長激素、促黃體激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以陣發性方法開釋。

因而，在測定此類激素時，有必要在密切相連的時刻距離內采納數份血樣本，以其間間值為測定值。又如當從臥位變為站立位時，血清中腎素活性將呈現顯著增高。再如醫治藥物的檢查，應根據藥代動力學挑選服藥后的zui適時刻抽血檢查。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢查的血清標本的搜集則沒有時刻和體位方面的影響，只是在處理和保留方面要思考以下幾個方面：

（1）要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，從而與后邊加入的HRP底物反應顯色。
（2）樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的生長，其所排泄的一些酶也許會對抗原抗體等蛋白發生分解效果；二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定方法發生非特異性攪擾。
（3）血清標本如是以無菌操作別離，則可以在2～8℃下保留一星期，如為有菌操作，則主張冰凍保留。樣本的長時刻保留，應在-70℃以下。
（4）冰凍保留的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞效果，從而導致假陰性成果。此外，凍融標本的混勻亦應留意，不要進行劇烈振動，重復倒置混勻即可。
（5）標本在保留中如呈現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時，應離心沉積后取上清檢查。