目前上的移液器校準方法是什么？

作者：乾蕓儀器科技

要回答這個問題，我們應先了解下什么是移液器，其功能是什么，對它進行校準時，又有哪些因素會影響其校準結果等問題。移液器顧名思義，是可以將一定量的液體從一個地方轉移到另一個地方的儀器。當然，移液器不僅能夠實現液體的轉移，還要能夠實現對量的控制。因此移液器的校準，便是對其基礎功能以及計量結果的檢驗。移液器的液體轉移性能好壞可以通過目視觀察判斷；但其計量的結果則需借助一些特定的工具和方法才可以得到驗證！ 

當前針對移液器計量結果的檢測、驗證，主流或主要的方法是采用衡量法！關于這一點，我們乾蕓儀器科技有限公司針對我們的客戶進行過咨詢，絕大多數都是選擇這一方法——也被稱之為“稱重法”。之所以被通稱為“稱重法”是因為該方法的原理是通過天平對移液器計量的一定容量的液體進行稱重，并以此數據為依據從而推斷出移液器計量結果的實際值——即容量。從這一方法的原理顯然可以看出，“衡量法（或稱重法）“校準過程極容易受到如下因素的影響。 

影響因數：

1 溫度，因為一定質量的液體的體積會受溫度的影響而改變的。因此一定質量的液體，在不同的溫度下，其體積也是不同的,這就導致利用移液器計量一定容量的液體時,會因為溫度的升高,而導致天平讀數即質量下降,從而據此結果推斷出的被轉移的液體的容量將小于實際容量; 

2 氣壓，在不同的大氣壓力下，相同質量的液體其體積也是不同的，但通常這種差異非常輕微，甚至可以忽略； 

3 用于稱量的高精度電子天平的水平度、穩定性以及被稱量物品放在電子天平托盤上的位置等，均會影響稱量結果（這一點在相關標準如JJG646，ISO8655等中并沒有明確列出，但據我們乾蕓儀器科技有限公司多年的實際操作經驗表明，這些來自天平細微影響對微小容量的移液器校準，還是應該得到重視的）； 

4 操作人員的操作習慣帶來的影響； 

5 測量儀器如電子天平、溫度計等自身的誤差帶來的影響； 

6 環境的相對濕度對待校準移液器的校準結果帶來的影響； 

可見采用傳統的衡量法（稱重法）對移液器進行校準，將會受到來自環境、人員以及測量儀器、設備等多種因素的影響。為此很多移液器校準或檢定實驗室不得不從實驗室整體設計上去避免、控制這些影響因素。如果實驗室環境設計、控制得當，則可zui大限度地將上述因素帶來的影響降低。但同時將導致一個新的、實際的問題，即是在專業的實驗室里面獲得的結果數據是否適用于移液器的實際使用場所使用？我們乾蕓儀器科技有限公司曾經做過類似測試，結果表明在專業的實驗室里得到的結果并不能*在終端用戶處得到復現！

因為終端用戶處的環境，是千差萬別的，有的甚至高于這些專業的實驗室，但更多的則是遠遠低于這些專業的實驗室。因此常常遇到在專業的實驗室里校準合格的移液器，當終端用戶在自己的工作場所重新校準時，卻發現其結果并不理想。這不一定是移液器質量出現問題，常常是因為校準的場所的環境改變了、校準的人員改變了，從而上述影響校準結果的各種因素也改變了。而解決這一問題的zui有效的辦法就是直接去到終端用戶的實際使用場所去對用戶的移液器進行校準，這樣得到的校準結果對特定的用戶來說才是zui真實的！ 

     我們當然可以將專業的實驗室的儀器、設備，如高精度電子天平、專業技術人員、環境控制的等各種設備搬遷至終端用戶處進行校準，但這顯然是不經濟的，也是行不通的。因為有些儀器，比如高精度電子天平，一旦離開了原本固定的使用場所，是需要重新校準合格才可以使用的。那么是否有另一辦法可以的、簡便的解決這個問題呢？這就是下文要與各位探討的一種全新的移液器校準方法——分光光度法。

分光光度法校準原理是將混合有特殊物質的液體——即溶劑(英文solution)，通過移液器量取后注入目標容器，然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長的光后，再對剩余的特定的波長的光進行測量，從而由此計算出移液器實際吸取和排出的液體——即溶劑。由分光光度法校準的原理可見，在采用分光光度法對移液器校準的過程中，可能對校準結果帶來影響的因素主要有：

1 溫度，因為分光光度法同樣需要使用到液體即溶劑，一定質量量的溶劑，其容積同樣受到溫度的影響而變化。但如果在用戶所在的場所對移液器進行校準，則此影響可以不計，因為某一個具體用戶所在的場所內的溫度變化，相對來說是固定的，那么這種由溫度帶來的影響，同樣也會存在于用戶實際工作中，因此這兩者是可以相互抵消的（乾蕓儀器科技有限公司備注：目前在該領域較為成熟的技術來自于美國一家實驗室）；

2 氣壓，同溫度帶來的影響一樣，由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的；

3 操作人員的操作習慣帶來的影響，因為分光光度法是可以被直接在終端用戶使用場所應用的一種移液器校準方法，其操作方法相對于傳統的衡量法（或稱重法）更為簡單、可靠，因此*可由移液器的使用者來直接對其使用的移液器采用分光光度法進行校準。這樣操作者的操作習慣在校準過程中表現出來的差異同樣存在與今后的使用過程中，這兩者之間的差異也可以相互抵消的；

4 環境濕度，因為分光光度法不是對移液器排出的溶劑進行稱量，而是對溶劑中所包含的特殊物質的光波進行測量，同時這種特殊物質是不可揮發的，因此在整個測試過程中，其已經通過移液器排出的溶劑，無論其質量如何變化，但結果是不會受到影響的，也就是不需要對環境的干濕度進行控制。

至此我們幾乎可以說，針對移液器采用分光光度發進行校準，其整個的測試過程是幾乎不受環境因素影響的，如溫度、氣壓、干濕度等，同時因在這一校準過程中，校準人和zui終使用人可以做到是同一人，從而因人的因素而帶來的差異也是降到zui低的。當然這種方法也不確定因素，比如分光光度法設備及使用的試劑自身也必然存在一定的誤差，這與傳統的衡量法（或稱重法）里測量儀器自身的誤差一樣，比如電子天平自身的誤差、溫度計自身的誤差、干濕度計以及氣壓計自身的誤差等，但這些來自于測量設備、溶劑自身的誤差，通常是恒定的，并且是可以事先測量、估算的，可以通過的測量數據進行修正的方法來避免的。

當然，目前分光光度法作為一種針對移液器校準的新的應用方法還是剛剛興起，在國外也只有少數研究機構或實驗室在使用，在我國目前僅停留在理論層面的評估上，并沒有在實際中推廣、應用。但因為分光光度法不受環境因素干擾，且設備攜帶方便，使得其應用環境更為隨意、寬廣，因此根據我們乾蕓儀器科技有限公司多年的行業經驗認為，這種新型的針對移液器校準的方法，在不久的將來，將會得到更多用戶的肯定與承認。

注：本文為乾蕓儀器科技有限公司原創技術文章，如您覺得有用或需要轉載，請注明本文出處并署上“本文來自“乾蕓儀器科技”“”字樣。請尊重智慧勞動，謝謝！

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