您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)！ 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)！ 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
15522676233，13366620421
當(dāng)前位置：北京百奧創(chuàng)新科技有限公司>>技術(shù)文章>>PCR是怎樣完成擴(kuò)增的呢?
PCR是怎樣完成擴(kuò)增的呢?PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction），實(shí)驗(yàn)過(guò)程是利用一段DNA為模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物的共同參與下，將該段DNA擴(kuò)增至足夠的數(shù)量，以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能的分析。
若我們想要分析/探索基因的遺傳信息，則需要大量的DNA片段，例如動(dòng)物的組織；兇手的毛發(fā)、血液、皮膚；古生物；歷史殘骸；患者的組織等，可能只能分離出少量的DNA，若想研究其遺傳信息，有著很大的阻礙和困難，在1985年，出現(xiàn)了一種方法：可以在短時(shí)間內(nèi)大量復(fù)制DNA片段，此方法為PCR，它能將很微量的遺傳物質(zhì)在數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增數(shù)百倍達(dá)到檢測(cè)水平，那么PCR是怎樣完成擴(kuò)增的呢? 讓我們來(lái)一起學(xué)習(xí)一下吧！
1.高溫變性
變性的目的是使模板DNA雙鏈解旋成為單鏈以便與引物結(jié)合。此步驟將溶液加熱至94-98C并保持20-30秒，破壞兩條鏈之間的氫鍵并生成單鏈 DNA 分子;同時(shí)也激活了DNA 聚合酶，該步驟的時(shí)間取決于所使用的聚合酶。
2.低溫退火
退火溫度取決于所用引物的Tm，一般比引物Tm低3-5C左右。該步驟將持續(xù)約 20-40 秒，當(dāng)反應(yīng)溫度隆低到50-65C時(shí)，引物與互補(bǔ)的DNA單鏈序列形成氫鍵，DNA聚合酶會(huì)結(jié)合至引物-模板雙鏈處開(kāi)始DNA合成。
3.中溫延伸
延伸時(shí)間取決于目的DNA片段的長(zhǎng)度和DNA聚合酶的合成能力。一般而言DNA聚合酶每60秒能夠合成1kb長(zhǎng)度的DNA。DNA模板-引物結(jié)合物在Taq DNA聚合酶的作用下，沿著5’一3’的方向合成一條與模板DNA鏈互補(bǔ)的鏈。延伸時(shí)的溫度通常為72C。
以上就是關(guān)于PCR是怎樣完成擴(kuò)增的問(wèn)題解答，如果有更多關(guān)于PCR技術(shù)的問(wèn)題，歡迎大家給小編留言~
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
