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人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基保存

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更新時間:2017-08-07 16:05:24瀏覽次數(shù):150次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基保存,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基保存
英文名稱:Human placental trophoblast cells in complete culture medium
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號:FS-X0226
人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基保存的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基保存收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

121359-200703    規(guī)格:    20mg/支
落花生枝葉    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121360-200401    規(guī)格:    20mg/支
天花粉    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121361-200401    規(guī)格:    20mg/支
肉桂    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121363-200401    規(guī)格:    20mg/支
雞眼睛    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121364-200401    規(guī)格:    20mg/支
洗碗葉    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121365-200602    規(guī)格:    20mg/支
瓜子金    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121366-200401    規(guī)格:    20mg/支
大青葉    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121367-200602    規(guī)格:    20mg/支
草玉梅    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121368-200401    規(guī)格:    20mg/支
巢脾    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121369-200401    規(guī)格:    20mg/支
白花丹    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121370-200401    規(guī)格:    20mg/支
綠包藤    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121371-200401    規(guī)格:    20mg/支
甜茶    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121372-200502    規(guī)格:    20mg/支
萬丈深    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121373-200401    規(guī)格:    20mg/支
葉下珠    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121374-200401    規(guī)格:    20mg/支
華佩蘭    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121375-200401    規(guī)格:    20mg/支
輪環(huán)藤根    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121376-200601    規(guī)格:    20mg/支
東風(fēng)桔    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121377-200401    規(guī)格:    20mg/支
穿山龍    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121378-200401    規(guī)格:    20mg/支
人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基保存云實皮    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121379-200401    規(guī)格:    20mg/支
藍布正    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121380-200502    規(guī)格:    20mg/支
楤木    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121381-200401    規(guī)格:    20mg/支
水金鳳    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121382-200401    規(guī)格:    20mg/支
菊花    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121384-200702    規(guī)格:    20mg/支
搜山虎    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121385-    規(guī)格:    20mg/支
連錢草    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121386-200401    規(guī)格:    20mg/支
車前草    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121387-200802    規(guī)格:    20mg/支
菊苣(毛菊苣)    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:    121388-200401    規(guī)格:    20mg/支
沙棘膏    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLC法鑒別    含量:

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