當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-574實驗方法
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更新時間:2017-06-28 09:29:36瀏覽次數(shù):159次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-574實驗方法現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 價格 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-574實驗方法 | 貼壁生長 |
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-574實驗方法
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使A375細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,12;D12S391:18,21;D13S317:11,11;D16S539:9,9;D18S51:12,17;D19S433:13,14.2;D21S11:29,30;D2S1338:16,24;D3S1358:15,17;D5S818:12,12;D6S1043:11,14;D7S820:9,9;D8S1179:11,14;FGA:23,23;Penta E:10,12;TH01:8,8;TPOX:8,10;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-574實驗方法細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-574實驗方法操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T]
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞
RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 [X464-20C]細(xì)胞 Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)
人十二脂腸腺癌;HuTu-80
CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CM-H024人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
Daudi細(xì)胞,人白血病細(xì)胞 小鼠腎足細(xì)胞,Mouse podocyte細(xì)胞 骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基SkMCM-prf
NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BEL-7404(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
CM-H024人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
Daudi細(xì)胞,人白血病細(xì)胞 小鼠腎足細(xì)胞,Mouse podocyte細(xì)胞 骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基SkMCM-prf
NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BEL-7404(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
SeleniteCystiroth 進(jìn)口分裝 1-丁烷(色譜級) 1-Chlorobutane 號: 109-69-3 質(zhì)量規(guī)格: for HPLC, ≥99.5%
mTSB肉湯 進(jìn)口分裝 十五辛酸(約5mmol)[離子對色譜級] IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol) 號: 335-67-1 質(zhì)量規(guī)格: 用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑
標(biāo)準(zhǔn)II號營養(yǎng)瓊脂 進(jìn)口分裝 燦爛黃 Brilliant Yellow 號: 420703 質(zhì)量規(guī)格:
小鼠全段甲狀旁腺素elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 重樓皂苷VI(標(biāo)準(zhǔn)品) Polyphyllin VI 號: 55916-51-3 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠去甲上腺素elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 重樓皂苷VII(標(biāo)準(zhǔn)品) Polyphyllin VII 號: 76296-75-8 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠前列腺特異性抗原elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 * Hyodeoxycholic acid 號: 83-49-8 質(zhì)量規(guī)格: ≥97%,BR
小鼠前列腺素elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 *(標(biāo)準(zhǔn)品) Hyodeoxycholic acid 號: 83-49-8 質(zhì)量規(guī)格: 含量測定
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-Cas9-574實驗方法骨堿性磷酸酶 進(jìn)口分裝 拉沙里菌素 英文名稱: Lachari bacterium 號: 25999-20-6 分子式: 612.77 分子量: C34H53NaO8
細(xì)胞分泌蛋白 進(jìn)口分裝 無花果蛋白酶 英文名稱: Fig protease 號: 819 分子式: 分子量:
趨化因子受體5 進(jìn)口分裝 薄荷 英文名稱: Mint 號: 10458-14-7 分子式: 154.25 分子量: C10H18O
肌酐 進(jìn)口分裝 己唑醇 英文名稱: F, f 號: 79983-71-4 分子式: 314.21 分子量: C14H17Cl2N3O
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