ELIS試劑盒將一個(gè)已知質(zhì)量，樣品中不含有雜質(zhì)的純物質(zhì)，參加至待測(cè)樣品溶液中，以此純物質(zhì)的量為規(guī)范，比照測(cè)定待測(cè)組分的含量，該純物質(zhì)稱為內(nèi)標(biāo)物。
內(nèi)標(biāo)物需滿意下列要求：能*溶解于樣品中，且不與待測(cè)組分發(fā)作化學(xué)作用；峰位盡可能與待測(cè)組分的峰位接近，但能與待測(cè)組分*分隔（別離度R≥1.5）的純物質(zhì)。若得不到純品，有必要預(yù)先測(cè)定其準(zhǔn)確含量，且雜質(zhì)峰不得干擾待測(cè)組分峰。
測(cè)定的成果較為準(zhǔn)確，因?yàn)橥ㄟ^丈量?jī)?nèi)標(biāo)物及被測(cè)組分的峰面積的相對(duì)值來進(jìn)行核算的，因而在一定程度上消除了操作條件等的改變所引起的差錯(cuò)。內(nèi)標(biāo)法的缺陷是操作程序較為費(fèi)事，每次剖析時(shí)內(nèi)標(biāo)物和試樣都要準(zhǔn)確稱量，有時(shí)尋覓適宜的內(nèi)標(biāo)物也有困難。 外標(biāo)法簡(jiǎn)潔，但進(jìn)樣量要求非常準(zhǔn)確，要嚴(yán)厲控制在與規(guī)范物相同的操作條件下進(jìn)行，不然形成剖析差錯(cuò)，得不到準(zhǔn)確的丈量成果。
ELIS試劑盒內(nèi)標(biāo)法是結(jié)合了峰面積歸一法和外標(biāo)法的長(zhǎng)處的一種辦法，它在參加內(nèi)標(biāo)后，按峰面積歸一法的剖析辦法進(jìn)行剖析，這就防止了因?yàn)檫M(jìn)樣的一致性及樣品輕視效應(yīng)導(dǎo)致的偶然差錯(cuò)，因而，它的剖析精密度也是比較高的，是氣相色譜的一種比較抱負(fù)的定量剖析辦法。它的缺點(diǎn)是前處理比較復(fù)雜，所花費(fèi)的時(shí)間也比較長(zhǎng)，一起有必要要有適宜的標(biāo)樣及內(nèi)標(biāo)物才干進(jìn)行內(nèi)標(biāo)法定量剖析。關(guān)于內(nèi)標(biāo)法定量剖析來說，內(nèi)標(biāo)物的挑選是及其重要的。
它有必要滿意如下的條件：
① 內(nèi)標(biāo)物與被剖析物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)要類似；
② 內(nèi)標(biāo)物應(yīng)能*溶解于被測(cè)樣品（或溶劑）中，且不與被測(cè)樣品起化學(xué)反應(yīng)；
③ 內(nèi)標(biāo)物的出峰方位應(yīng)該與被剖析物質(zhì)的出峰方位相近，且又不共溢出，意圖是為了防止GC的不穩(wěn)定性所形成的靈敏度的差異；
④ 挑選適宜的內(nèi)標(biāo)物參加量，使得內(nèi)標(biāo)物和被剖析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，以免因?yàn)樗鼈兲幵诓煌憫?yīng)值區(qū)域而導(dǎo)致的靈敏度偏差。
① 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣參加規(guī)范樣品，制成混合標(biāo)樣，并制造一系列的已知濃度的作業(yè)標(biāo)樣?；旌蠘?biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。
② 注入色譜柱，以（標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積）為響應(yīng)值。
③ 依據(jù)響應(yīng)值與作業(yè)標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=f×A，制成規(guī)范曲線。
④ 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣參加不知道樣品，注入色譜柱，得到欲測(cè)組分的響應(yīng)值。
⑤ 依據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測(cè)組分的濃度。
ELIS試劑盒操作過程中樣品和內(nèi)標(biāo)是混合在一起注入色譜柱的，因而只需混合溶液中被測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)的量的比值穩(wěn)定，上樣體積的改變不會(huì)影響影響定量成果。
內(nèi)標(biāo)法抵消了上樣體積，甚至活動(dòng)相、檢測(cè)器的影響，因而比外標(biāo)法準(zhǔn)確。
會(huì)員1.png)