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ELISA試劑盒操控反應條件

閱讀:73發(fā)布時間:2017-11-3

ELISA試劑盒板應該是吸附功用好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間功用附近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的不同,各種產品的質量差異很大。因此每一批號的聚苯乙烯制品在運用前須檢查其功用。常用的檢查方法為:以必定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔內參與恰當稀釋的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗刷,加底物顯色,停止酶反應后分別測每孔溶液的吸光度。使各讀數(shù)在0.8左右。核算全部讀數(shù)的均勻值。全部單個讀數(shù)與均勻讀數(shù)之差應小于10%.與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特征為質軟板薄,可切開,價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質的吸附功用比聚苯乙烯高,但空白值有時也略高。
為比較不同固相在某一ELISA試劑盒定中的好壞,可用以下方法加以檢驗:用其他免疫學測定方法選出一個典型的陽性標本和一個典型的陰性標本。將它們分別進行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預訂的ELISA操作過程進行測定,然后比較測定作用。在哪一種載體上陽性作用與陰性作用判別zui大,這種載體就是這一ELISA測定的zui合適的固相載體。
免疫熒光技術雖已廣泛應用于免疫學的研討與確診,但是熒光抗體染色標本不能*保存,對組織細胞的纖細結構分辯不清,免疫酶技術則能打敗上述缺少,符號免疫酶技術的敏感性更優(yōu)于免疫熒光法,對白臘切片標本尤為適用,為免疫病理研討開辟了一條新途徑,酶顯色產品具有較高的電子密度,通過恰當處理還可以進行免疫電鏡查詢,免疫酶組化技術分為酶符號法與非符號抗體技術, ELISA試劑盒前者是將酶通過交聯(lián)劑結合在抗體分子上,構成酶符號抗體。后者是將酶作為抗原與相應的特異性抗體聯(lián)接進行的免疫反應,稱為非符號抗體酶技術。
ELISA試劑盒免疫酶技術運用酶催化底物反應的生物擴大作用,前進特異性抗原-抗體免疫學反應檢測敏感性的一種符號免疫技術。該技術所用的酶要求純度高、催化反應的轉化率高、專一性強、性質安穩(wěn)、來歷豐厚、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質安穩(wěn),繼續(xù)保留著它的活性部分和催化才能。在受檢標本中不存在與符號酶相同的酶。其他它的相應底物應易于制備和保存,價格低廉,有色產品易于測定,光吸收高。


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