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簡析合適ELISA試劑盒檢測樣本的辦法

閱讀:64發布時間:2017-10-19

血清是zui常用的ELISA試劑盒標本之一,ELISA檢測中血漿一般可視為與血清平等的標本,標本中攪擾性物質是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質分為內源性物質和外源性物質兩大類;外源性物質常常是因為用于ELISA測定的血標本的收集、儲存等不妥所形成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過久、標本凝聚 不全和*中添加物等影響。
因為各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞損壞溶解時釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的 ELISA測定中,會導致非特異性顯色,攪擾測定成果。
標本受細菌污染 :因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可發作非特異性顯色而攪擾測定成果。
標本保存不妥 :在冰箱中保存過久的標本,血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構成二聚體,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、乃至形成檢測OD值偏高;
標本凝聚不全;在
ELISA試劑盒檢測中影響血清血漿樣本的要素許多,在考慮試劑要素和操作要素之外,也應從標本要素方面進行剖析。
常見的攪擾物質有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質和其它物質等。

類風濕因子 :血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)在ELISA檢測中,可與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合,然后導致檢測OD值偏高。
補體 : ELISA體系中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發作變構,其FC段的補體C1q分子結合位點被露出出來,使C1q 能夠將二者連接起來,然后形成檢測OD值偏高。
嗜異性抗體;人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig (s) 結合的天然嗜異性抗體,可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來,也能形成檢測OD值偏高。
ELISA試劑盒此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質及血清中脂質過高、*、血紅蛋白及血液粘度過大等,均對ELISA測定成果有攪擾效果。


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