1.主要的洗刷：
ELISA試劑盒假如洗刷不充分，會形成一系列的區別和高布景zui終致使試驗成果誤差大。假如未的資料殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。條件答應的情況下，恰當添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻撓非特異反響。假如布景過高，置疑洗刷不行時，能夠測驗添加洗刷次數。
2.要害的關閉：
ELISA試劑盒關閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的位點。這就下降了可產生信號的抗體非特異的機會。假如布景過高，置疑關閉不充分，那么能夠測驗運用更高濃度的關閉液，或恰當延伸關閉時刻。
目前主要有兩種類型的關閉液：蛋白和非離子型去污劑。運用的類型須取決于多個要素，包含微孔板的外表試劑、吸附的抗原、抗體和檢查試劑。好的關閉液應下降非特異性，但它不應當與抗原、抗體或檢查試劑發作相互作用。
3.抗體濃度須優化：
ELISA試劑盒假如試劑稍有不同，則也許需要優化抗體的量。非特異的抗體會添加布景。為了避免這一點，切勿運用過多的一抗或二抗。
第四、檢查試劑要適當：
必定不能夠運用過多的檢查試劑。假如濃度過高，或者未準確稀釋，則會致使高布景。也不要顯色過度，如有必要，優化一下何時應加入停止液。
