ELISA試劑盒頂用ELISA檢測時（以檢測弓漿蟲IgM為例），用無特異抗體的血清稀釋陽性血清制作規范曲線，挑選的稀釋度應很容易差異陽性和暗影成果的稀釋度。每次實驗均應同時使用陰性對照血清，可挑選強陽性的血清作為規范對照血清，并可自己設定其為100單位（免疫酶單位-EIU）。這樣每次實驗均參閱陽性血清成果斷定每份血清的相對抗體水平，其核算公式如下：標本值-陰性對照值 陽性對照值-陰性對照值
抗體水平（樣本）=（規范值-陰性對照值）/（陽性對照值-陰性對照值）×EIU
用在450nm檢測的吸光度核算，zui終的值為EIU。
如果國內或上的規范抗體和檢測辦法，那么所用的參閱血清應與規范血清對照實驗進行規范化，但如果所用的檢測辦法不同，規范化時就存在不同，不同的辦法檢測出的成果不能反映出參閱血清和規范血清之間的不同。
ELISA試劑盒自己制備的規范參閱血清應確保質量，并要有滿足的血清，小量分裝存儲與-20℃，或凍干存儲。規范血清檢測的吸光度值應確保在必定范圍內，以便檢測每次實驗的吸光度值的改變。
