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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)怎樣下降實(shí)驗(yàn)背景

閱讀:284發(fā)布時(shí)間:2017-6-2

如今由于ELISA試劑盒檢查的便利,許多尋常百信也會(huì)采購(gòu)ELISA試劑盒來(lái)做試驗(yàn),ELISA試劑盒的品種許多,有人elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒等各種,不過(guò)在大家的心目中,現(xiàn)在仍是進(jìn)口ELISA試劑盒比國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒要好。不管是進(jìn)口的仍是國(guó)產(chǎn)的ELISA試劑盒,在試驗(yàn)的時(shí)分,咱們老是不行忽略試驗(yàn)的布景影響,那么怎樣才能把試驗(yàn)布景影響下降到zui低呢?要從以下幾個(gè)方面入手:
1.洗刷:看似無(wú)聊的過(guò)程,其實(shí)是試驗(yàn)的重中之重,由于假如未的資料(如非特異的抗體或檢查試劑)殘留在微孔板中,那么它會(huì)添加布景噪音。如有必要,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異反響。假如布景過(guò)高,而您置疑洗刷不夠時(shí),能夠測(cè)驗(yàn)添加洗刷次數(shù)。
2.ELISA試劑盒密封:關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占有微孔板中潛在的位點(diǎn)。這就下降了可發(fā)作信號(hào)的抗體非特異的時(shí)機(jī)。您當(dāng)然也期望抗體只與意圖蛋白吧。假如您的布景過(guò)高,置疑關(guān)閉不充分,那么您能夠測(cè)驗(yàn)運(yùn)用更高濃度的關(guān)閉液,或恰當(dāng)延伸關(guān)閉時(shí)刻。
假如您一向被布景問(wèn)題所困惑,那么或許您該花些時(shí)刻來(lái)優(yōu)化關(guān)閉液。這也許需求時(shí)刻,但也是值得的。現(xiàn)在主要有兩品種型的關(guān)閉液:蛋白和非離子型去污劑。您運(yùn)用的類型須取決于多個(gè)要素,包含微孔板的外表試劑、ELISA試劑盒吸附的抗原、您的抗體和檢查試劑。好的關(guān)閉液應(yīng)下降非特異性,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢查試劑發(fā)作相互作用。
3.抗體濃度: ELISA試驗(yàn)咱們通常會(huì)follow師兄師姐留下來(lái)的操作過(guò)程,ELISA試劑盒但是假如試劑稍有不一樣,則也許需求優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體會(huì)添加布景。為了防止這一點(diǎn),切勿運(yùn)用過(guò)多的一抗或二抗。
4.ELISA試劑盒檢查試劑:切勿運(yùn)用過(guò)多的檢查試劑。假如濃度過(guò)高,或者未準(zhǔn)確稀釋,則會(huì)致使高布景。也不要顯色過(guò)度,如有必要,優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)參加停止液。

 


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