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動物血清elisa試劑盒免疫組化抗原修復方法

閱讀:119發布時間:2017-9-8

動物血清elisa試劑盒組織在開始染色之前都需要先修復抗原,這是由于在固定過程中產生了亞甲基橋使蛋白之間交聯屏蔽了抗原位點。兩種抗原修復方法為熱修復法(稱之為熱誘導抗原表位修復或HIER)和酶解法。

一、熱修復法

1. 熱修復緩沖溶液

下面是三種HIER較為常用的緩沖溶液,對于一個特定的抗體,在沒有其他研究者建議的情況下,要通過實驗確定選用哪種修復緩沖液。

1)  *緩沖液(10 mM Sodium Citrate,0.05% 吐溫- 20, pH 6.0)

2) 1 mM EDTA, 調至pH 8.0

3) Tris/EDTA 緩沖液(10mM Tris, 1 mM EDTA 溶液, 0.05% 吐溫-20, pH 9.0)

2. 熱修復方法

a) 高壓蒸汽法

玻片要置于金屬架上

1)材料及試劑

• 家用不銹鋼高壓鍋

• 加熱板

• 玻片架放置容器(容量大約400-500ml)

• 抗原修復緩沖液(如Tris/EDTA pH 9.0,*pH 6.0)

2)方法

1. 動物血清elisa試劑盒將合適的抗原修復緩沖液加入高壓鍋內,然后將鍋置于加熱板并開至zui大功率,此時不要把蓋子蓋緊。在等待煮沸過程中,進行脫蠟至水。

2.煮沸后,將玻片從自來水中取出放入高壓鍋內。小心熱溶液- 使用鑷子。依照說明書加上加壓閥。

3.高壓鍋達到zui大壓力后,維持3分鐘。

4.3分鐘過后,關掉加熱板,將高壓鍋取下放置。

5.打開高壓鍋閥門,冷水冷卻鍋身。壓力降下后,打開鍋蓋,冷水冷卻10分鐘。

6.繼續染色。
140739-200501    規格:    40mg    *:    HPLC法含量測定    苯乙酰*
140746-200801    規格:    10mg    *:    檢查    氧化型*
140747-201001    規格:    50mg    *:    鑒別    *
140749-200701    規格:    50mg    *:    HPLC法含量測定    **
140750-200701    規格:    20mg    *:    HPLC法含量測定    *
140751-200701    規格:    6U    *:    鑒別    *
動物血清elisa試劑盒

 


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