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干細胞表面受體配體結合檢測的新技術

時間:2018-3-21閱讀:444
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Tag-lite是SNAP-Tag與HTRF技術相結合,用來進行干細胞表面受體分析的一種技術。
    SNAP和CLIP是小的融合標簽蛋白,可特異地與底物通過芐甲基不可逆共價結合, 其底物分別為芐甲基鳥嘌呤(BG)和芐甲基胞嘧啶(BC)。由于底物可與各種染料形成衍生物,這樣,通過共價反應,染料就標記到SANP或CLIP上了。
    SNAP或CLIP可以非常容易地融合到蛋白質的N端或C端,所以我們可以構建SNAP或CLIP與目標蛋白的表達載體。質粒轉染、融合蛋白表達后,加入標記了熒光染料的底物,我們可以得到標記了熒光染料的目標蛋白。
    在Tag-lite技術中,用pSNAP或pCLIP與編碼目標GPCR的基因構建質粒,轉染入細胞后,就可表達N端融合了SNAP或CLIP的目標GPCR。
    底物(BG或BC)與HTRF熒光染料反應形成衍生物,例如與供體(Donor)鋱穴狀化合物(Lumi4®-Tb)形成衍生物,SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白與其反應,則Tb被標記到GPCR上。加入受體(Acceptor)熒光染料標記的配體,可以進行受體配體結合實驗。根據實驗目的,HTRF的能量受體(Acceptor)與底物形成衍生物,則Acceptor被標記到GPCR上,干細胞可以進行GPCR同源二聚化實驗。除此之外,我們還可以進行GPCR異源二聚化實驗、寡聚化實驗以及內源化實驗等細胞表面受體分析。
鑒別    含量:    進口/國產    棉酚    20mg/支    英文名稱    111517-200001    規格:
UV法含量測定    含量:    進口/國產    雪膽素甲    20mg/支    英文名稱    111518-200602    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    木犀草素    20mg/支    英文名稱    111520-200504    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    金絲桃苷    20mg/支    英文名稱    111521-201004    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    升麻苷    20mg/支    英文名稱    111522-201008    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    5-O-甲基維斯阿米醇苷    20mg/支    英文名稱    111523-200405    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    木香烴內酯    20mg/支    英文名稱    111524-201006    規格:
含量測定    含量:    進口/國產    去氫木香內酯    20mg/支    英文名稱    111525-200706    規格:
干細胞

 

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