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人正常組織來源細胞獲得牽引力的來源

時間:2018-2-26閱讀:112
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人正常組織來源細胞主要通過嵌在細胞膜上的蛋白質與環境相互作用,這代表了產生和解釋細胞力的關鍵點。一些蛋白質會響應液體流動對其產生的“推力”,就像在血管中的情況;而另一些蛋白質在細胞被其鄰近細胞拖拽或黏附到其他鄰近蛋白質時,產生與張力相關的信號。

20 世紀 90 年代,牽引力顯微鏡(TFM)出現,成為*個真正可以定量測量這種力的工具。 例如,1999 年,當時供職于伍斯特麻省大學醫學院的 Yu-Li Wang 和附近波士頓大學的 Micah Dembo,將一種稱為成纖維細胞的結締組織細胞鋪在一種嵌入了熒光微珠的凝膠材料上。隨后他們展示了可以使用 TFM,通過測量微珠的位移來推算出這些細胞產生的力。德國埃爾朗根 - 紐倫堡大學的生物物理學家 Ben Fabry 說:“這就像一個彈簧秤,你對彈簧秤施重并測量其變形程度,如果你知道彈簧的剛度,你就能確定力的大小。”

TFM 已經成為研究單個細胞和組織樣互連細胞片層的標準方法。Clare Waterman 任職于馬里蘭州貝塞斯達的國家心臟肺血液研究所,她已經使用 TFM 來研究細胞遷移,該過程在一定程度上由被稱為黏著斑的細胞結構將自身粘連在周圍細胞外基質(ECM)上時所產生的力介導。

Waterman 小組開發出了相關方法來增加 TFM 實驗可以成像的微珠數量,以便產生超高分辨率的力圖。她說:“我們可以在每個黏著斑下設置 50 個標記物,所以我們可以達到亞微米級別的分辨率。”這使得她的小組能夠揭示在黏著斑處產生的力,是如何觸發在胚胎發育等過程中協調定向細胞運動的分子事件。

當然,微珠對細胞運動的響應是一個多維移動,這種多維移動比一維的彈簧秤變形要復雜得多。TFM Z初需要強大的超級計算機來解讀數據,不過現代計算方法已經使該技術更易使用。即使如此,將微珠的位移數據轉換成力的測量仍然具有挑戰性,并且存在很多潛在的錯誤源。Waterman 說:“可能有一個單細胞在相反的方向拉,使它看起來基本上沒有形變。而且當微珠的運動超出了細胞的邊界,就將很難處理。”

其他研究團隊正在將 TFM 擴展到三維,以更好地映射生物學上的實際情況。例如,Fabry 和他的同事開發了一種 TFM 方法,使用膠原蛋白構成的凝膠,在三維跟蹤細胞力,膠原蛋白是 ECM 的一種關鍵的蛋白質成分。他的團隊能夠探測細胞產生的力、以及細胞通過一種合成的三維‘組織’時的速度和方向這幾者之間的關系——有望為癌細胞的轉移生長建模。

但他的方法也加大了對分析和計算的挑戰。Fabry 說:“膠原蛋白是非常難處理的材料 — 它的行為是高度非線性的,也就是說,如果你稍微拉伸它一點,它是柔軟的,但如果你多拉伸一點,它會突然變得非常僵硬。”

為了避開這個計算上的負擔,新澤西州普林斯頓大學生物醫學工程師 Celeste Nelson 在她的器官發育研究中采用了較低分辨率的數據。她說:“我們更關心的是在上百或上千人正常組織來源細胞的總數中找到力的大小的相對差異。然而,力的產生從根本上來說是動態的;需要在多個時間點收集這些三維數據,她說:“這樣計算量自然會暴增。”
HPLC≥98%    比枯枯靈;畢靈堿;荷包牡丹堿    (+)-Bicuculline    20mg/支
HPLC≥98%    異槲皮苷    Isoquercitrin;Isoquercetin; Isoquercitroside    20mg/支
HPLC≥98%    乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇醇靈堿    Acetylcorynoline    20mg/支
HPLC≥98%    三葉豆紫檀苷    Trifolirhizin;(-)-Maackiain-3-O-glucoside    20mg/支
HPLC≥98%    去氫二異丁香酚    Dehydrodiisoeugenol    20mg/支
HPLC≥98%    利卡靈-B;利卡靈B    (-)-Licarin B    20mg/支
HPLC≥98%    肉豆蔻木脂素    Myrislignan    20mg/支
HPLC≥98%    澤瀉醇B-23醋酸酯    Alisol B 23-acetate    20mg/支
HPLC≥98%    原花青素B2    Procyanidin B2    5mg/支
HPLC≥98%    人參皂苷F1    Ginsenoside F1    20mg/支
人正常組織來源細胞

 

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