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原代細胞在實驗室中的應用

時間:2017-11-24閱讀:109
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原代細胞的產生實質上是受熒光蛋白基因的控制的,在這種基因的轉錄和翻下指導合成的熒光蛋白實質上就是熒光素酶了

熒光素是自然界中能夠產生生物螢光的酶的統稱,其中Z有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內的螢光素酶。在相應化學反應中,螢光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有螢光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似)。

螢光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。螢光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉染到細胞中。研究者利用基因工程已經使得小鼠、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成螢光素酶。間接體外成像是一種強大的研究手段,可以對整個動物體中的細胞群落進行分析:將不同類型的細胞(骨髓干細胞、T細胞等)標記上(即表達)螢光素酶,就可以用高敏感度的CCD相機進行對動物體內進行活體觀察而不會傷害到動物本身。

在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出螢光,而發出的光子可以被光敏感元件,如螢光探測器或改進后的光學顯微鏡探測到。這就使得對包括感染在內的多種生命活動進程進行觀察成為可能。例如,螢光素酶可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂。法醫可以用含有螢光素酶的溶液來檢測犯罪現場中殘留的血跡。醫院用原代細胞的發光來發現特定的疾病。螢光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學研究中,例如,用于在轉染過螢光素酶的細胞中檢測特定啟動子的轉錄情況或用于探測細胞內的ATP的水平;這一技術被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay)。螢光素酶是一個熱敏感蛋白,因此經常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護能力。
竹節參苷V    34367-04-9    人參皂苷Ro    Ginsenoside Ro        HPLC≥98%    20mg/支
    136849-88-2    灰氈毛忍冬皂苷乙    Macranthoidin B        HPLC≥98%    20mg/支
白果苦內酯J    107438-79-9    銀杏內酯J    Ginkgolide J        HPLC≥98%    20mg/支
    39011-92-2    特女貞苷    Specnuezhenide        HPLC≥98%    20mg/支
梔子酸    27741-01-1    京尼平苷酸    Geniposidic acid        HPLC≥98%    20mg/支
    33289-85-9    川續斷皂苷乙    Dipsacoside B        HPLC≥98%    20mg/支
    64421-28-9    山梔苷甲酯    Shanzhiside methylester        HPLC≥98%    20mg/支
原代細胞

 

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