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如何進行原代細胞復蘇?

時間:2017-9-25閱讀:145
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如何進行原代細胞復蘇?

1. 從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養液,混勻;
3. 離心, 1000rpm,5min;
4. 棄去上清液,加入含10%小牛血清培養液重懸細胞,計數,調整細胞密度,接種培養瓶,37℃培養箱靜置培養;
5. 次日更換一次培養液,繼續培養。

1.從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存,但為對數生長期細胞。在凍存前一天換一次培養液;
2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;
3.原代細胞凍存和復蘇用新配制的培養液。
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原代細胞

 

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