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318次原代細胞培養基本信息簡介
原代細胞來源于一塊碎的或酶消化的組織。原代培養物,是多種類型細胞的混合物,保留了其來源組織的特點。
一段時間后,原代培養的細胞會達到融合狀態,即在培養瓶中的所有可用空間由于細胞擴增都被覆蓋。在此之后,細胞需要消化(通常用蛋白水解酶,如胰蛋白酶)為單個細胞并且傳代(分裂,傳代或轉移)。在*次傳代以后,培養物通常被稱為一個細胞系。每一次傳代培養,細胞群體由于快速生長的細胞占主導地位而變得更均勻。具有所需特性的細胞也可以通過克隆,從培養物中選出。
二倍體細胞很少可以倍增超過幾代。它們只有有限的復制能力,并且在細胞倍增20至80次后開始減緩并Z終停止分裂。Z近的證據表明,某些細胞中觀察到的細胞衰老與預計的復制性衰老不同,可能是由于不適當的培養條件導致的。還有其他數據顯示,對某些物種的細胞系(尤其是人源的)即使生長在改進的培養條件下仍存在復制衰老。這種衰老是由細胞分裂時染色體末端(端粒)縮短調控的。
正如以上提到的,細胞系要么在培養瓶表面貼壁生長(錨定依賴性)要么懸浮生長(非錨定依賴性)。細胞的生長和分裂,通常遵循一個由四個階段組成的特征性增長模式:停滯期,對數期(指數期),平穩期(平臺期)和衰退期。
停滯期——將細胞接種至培養瓶之后,細胞逐步恢復的同時,緩慢生長。
對數期(指數期)——細胞進入一個對數生長的時期,一直持續到整個生長表面被占滿或細胞密度超過培養基提供營養的能力。
平穩期——細胞增殖減慢或停止。
衰退期——如果不更換培養基且細胞數量不減少,細胞活力會下降,并出現細胞死亡。
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