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小鼠155kDa核孔蛋白(NUP155)elisa試劑盒靈敏度低的原因

時間:2020/8/19閱讀:88
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小鼠155kDa核孔蛋白(NUP155)elisa試劑盒靈敏度低的原因:

1 試劑盒未充分平衡試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)
2 樣品不適合做ELISA檢測樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優(yōu)化檢測的條件(例如稀釋液的成分)
3 酶標板在貯存或洗后拍干時過分干燥防止板過于干燥
4 包被抗體遭到破壞操作溫和,移液槍不能碰到孔底
5 樣本和抗體孵育條件不合適按照說明書條件,建議孵育過程中全程振蕩孵育。
6 洗滌浸泡時間過長按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間;
7 偶聯(lián)HRP試劑污染棄去試劑,重新配置
8 錯誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑棄去試劑,重新配置
9 TMB底物孵育時間過短,因非人為因素影響,需要優(yōu)化孵育時間確定合適的孵育時間:人為判定-高濃度的標準品出現(xiàn)深藍色;S4-5有淡藍色;機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65
10 樣本濃度過高或存在基質(zhì)效應(yīng)建議做不同稀釋倍數(shù),確認樣本Z合適的稀釋倍數(shù)。
11 酶標儀濾光片設(shè)置有問題或者波長選擇不對確認儀器設(shè)置及選擇正確的波長檢測。
12 酶標板不適合做ELISA不能使用細胞培養(yǎng)板,建議使用ELISA高吸附力板子。

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